公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱：黑色素瘤細(xì)胞
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)elisa檢測試劑盒英文名稱：γ-GCS ELISA Kit，英文縮寫：γ-GCS，產(chǎn)品別名：γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)ELISA檢測試劑盒，γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

αL巖藻糖苷酶(AFU)elisa檢測試劑盒英文名稱：AFU ELISA Kit，英文縮寫：AFU，產(chǎn)品別名：αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA檢測試劑盒，αL巖藻糖苷酶(AFU)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)elisa檢測試劑盒英文名稱：Aβ25-35 ELISA Kit，英文縮寫：Aβ25-35，產(chǎn)品別名：β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)ELISA檢測試劑盒，β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

Syndecan-3/(SDC3)elisa檢測試劑盒英文名稱：SDC3 ELISA Kit，英文縮寫：SDC3，產(chǎn)品別名：Syndecan-3/(SDC3)ELISA檢測試劑盒，Syndecan-3/(SDC3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

P27蛋白(P27)elisa檢測試劑盒英文名稱：P27 ELISA Kit，英文縮寫：P27，產(chǎn)品別名：P27蛋白(P27)ELISA檢測試劑盒，P27蛋白(P27)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

F-肌動蛋白(F-actin)elisa檢測試劑盒英文名稱：F-actin ELISA Kit，英文縮寫：F-actin，產(chǎn)品別名：F-肌動蛋白(F-actin)ELISA檢測試劑盒，F(xiàn)-肌動蛋白(F-actin)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

CD5分子樣蛋白(CD5L)elisa檢測試劑盒英文名稱：CD5L ELISA Kit，英文縮寫：CD5L，產(chǎn)品別名：CD5分子樣蛋白(CD5L)ELISA檢測試劑盒，CD5分子樣蛋白(CD5L)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)elisa檢測試劑盒英文名稱：NFKBIE ELISA Kit，英文縮寫：NFKBIE，產(chǎn)品別名：B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)ELISA檢測試劑盒，B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

Ⅰ型前膠原氨基端肽(PⅠNP)elisa檢測試劑盒英文名稱：PⅠNP ELISA Kit，英文縮寫：PⅠNP，產(chǎn)品別名：Ⅰ型前膠原氨基端肽(PⅠNP)ELISA檢測試劑盒，Ⅰ型前膠原氨基端肽(PⅠNP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)elisa檢測試劑盒英文名稱：2，3-DPG ELISA Kit，英文縮寫：2，3-DPG，產(chǎn)品別名：2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)ELISA檢測試劑盒，2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

血小板/內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)elisa檢測試劑盒英文名稱：PECAM1 ELISA Kit，英文縮寫：PECAM1，產(chǎn)品別名：血小板/內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)ELISA檢測試劑盒，血小板/內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。
Hs852.T細(xì)胞Phospho-Histone H2A.X (Ser139)  磷酸化組蛋白H2AX抗體規(guī)格 0.1ml

phospho-Histone H1.4(Thr18)  磷酸化組蛋白H1.4抗體規(guī)格 0.1ml

phospho-Histone H1.4(Ser27)  磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體規(guī)格 0.1ml

phospho-Histone H1(Thr146)  磷酸化組蛋白H1抗體規(guī)格 0.1ml

Phospho-HER4 (Tyr984)  磷酸化HER4抗體規(guī)格 0.1ml

Phospho-HER4 (Tyr1284)  磷酸化HER4抗體規(guī)格 0.1ml

Phospho-HER4 (Tyr1188)  磷酸化HER4抗體規(guī)格 0.1ml

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