產(chǎn)品名稱:肝癌細胞
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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Huh-1細胞
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T25
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FS-X4053
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公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
筑絲蛋白1(TEKT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforTektin1(TEKT1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
補體成分3(C3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforComplementComponent3(C3) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
肌原纖蛋白2(FBN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforFibrillin2(FBN2) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
類胰蛋白酶(TPS)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforTryptase(TPS) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
腺苷酸激酶3(AK3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforAdenylateKinase3(AK3) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforUncouplingProtein2,Mitochondrial(UCP2) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
胃動素(MTL)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforMotilin(MTL) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
白介素12(IL12)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforInterleukin12(IL12) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
內(nèi)脂素(VF)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforVisfatin(VF) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
肌球蛋白重鏈6(MYH6)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforMyosinHeavyChain6,CardiacMuscle,Alpha(MYH6) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
Huh-1細胞Perilipin A+B 脂滴包被蛋白A+B抗體規(guī)格 0.2ml
Perilipin A 脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體規(guī)格 0.1ml
PER2/Period circadian protein 2 節(jié)律蛋白2抗體規(guī)格 0.2ml
PER1 protein 節(jié)律抑制蛋白PER1抗體規(guī)格 0.2ml
Peptide YY/PYY 酪酪肽抗體規(guī)格 0.2ml
PEPT2/SLC15A2 腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2抗體規(guī)格 0.1ml
PEPT1 腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運蛋白1抗體規(guī)格 0.1ml
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