公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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MES-SA/Dx5細(xì)胞
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T25
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FS-X4079
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產(chǎn)品名稱:**肉瘤細(xì)胞
形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:McCoy's5a+10%FBS
1:2~1:8傳代;每周2~3次。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
胎盤堿性磷酸酶(PLAP)elisa檢測試劑盒英文名稱:PLAP ELISA Kit,英文縮寫:PLAP,產(chǎn)品別名:胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA檢測試劑盒,胎盤堿性磷酸酶(PLAP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
食欲素受體(OXR)elisa檢測試劑盒英文名稱:OXR ELISA Kit,英文縮寫:OXR,產(chǎn)品別名:食欲素受體(OXR)ELISA檢測試劑盒,食欲素受體(OXR)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
絲氨酸蛋白酶HTRA1(HTRA1)elisa檢測試劑盒英文名稱:HTRA1 ELISA Kit,英文縮寫:HTRA1,產(chǎn)品別名:絲氨酸蛋白酶HTRA1(HTRA1)ELISA檢測試劑盒,絲氨酸蛋白酶HTRA1(HTRA1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)elisa檢測試劑盒英文名稱:p2 ELISA Kit,英文縮寫:p2,產(chǎn)品別名:神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA檢測試劑盒,神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
乳鐵蛋白(LTF)elisa檢測試劑盒英文名稱:LTF ELISA Kit,英文縮寫:LTF,產(chǎn)品別名:乳鐵蛋白(LTF)ELISA檢測試劑盒,乳鐵蛋白(LTF)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
醛固酮(ALD)elisa檢測試劑盒英文名稱:ALD ELISA Kit,英文縮寫:ALD,產(chǎn)品別名:醛固酮(ALD)ELISA檢測試劑盒,醛固酮(ALD)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
羥基賴正己氨酸(HLNL)elisa檢測試劑盒英文名稱:HLNL ELISA Kit,英文縮寫:HLNL,產(chǎn)品別名:羥基賴正己氨酸(HLNL)ELISA檢測試劑盒,羥基賴正己氨酸(HLNL)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
平滑肌肌動蛋白(SMA)elisa檢測試劑盒英文名稱:SMA ELISA Kit,英文縮寫:SMA,產(chǎn)品別名:平滑肌肌動蛋白(SMA)ELISA檢測試劑盒,平滑肌肌動蛋白(SMA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
凝血酶(Thrombin)elisa檢測試劑盒英文名稱:Thrombin ELISA Kit,英文縮寫:Thrombin,產(chǎn)品別名:凝血酶(Thrombin)ELISA檢測試劑盒,凝血酶(Thrombin)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
內(nèi)皮素2(EDN2)elisa檢測試劑盒英文名稱:EDN2 ELISA Kit,英文縮寫:EDN2,產(chǎn)品別名:內(nèi)皮素2(EDN2)ELISA檢測試劑盒,內(nèi)皮素2(EDN2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
球蛋白γ-1鏈C區(qū)(IGHGI)elisa檢測試劑盒英文名稱:IGHGI ELISA Kit,英文縮寫:IGHGI,產(chǎn)品別名:球蛋白γ-1鏈C區(qū)(IGHGI)ELISA檢測試劑盒,球蛋白γ-1鏈C區(qū)(IGHGI)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
MES-SA/Dx5細(xì)胞PANK2 泛酸激酶2抗體規(guī)格 0.2ml
PANK1 泛酸激酶1抗體規(guī)格 0.2ml
Pancreatic Lipase 胰脂肪酶抗體規(guī)格 0.1ml
Pancreatic Amylase 胰淀粉酶抗體規(guī)格 0.1ml
pan methyl Lysine 泛甲基賴氨酸抗體規(guī)格 0.2ml
pan 14-3-3 14-3-3蛋白抗體規(guī)格 0.2ml
PALB2 癌易感基因相關(guān)蛋白2規(guī)格 0.1ml