公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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HTh-7細(xì)胞
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T25
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FS-X4256
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產(chǎn)品名稱:甲狀腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS
1:2傳代
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)??(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
Nicalin蛋白(NCLN)elisa檢測試劑盒英文名稱:NCLN ELISA Kit,英文縮寫:NCLN,產(chǎn)品別名:Nicalin蛋白(NCLN)ELISA檢測試劑盒,Nicalin蛋白(NCLN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Ki-67蛋白(Ki67P)elisa檢測試劑盒英文名稱:Ki67P ELISA Kit,英文縮寫:Ki67P,產(chǎn)品別名:Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA檢測試劑盒,Ki-67蛋白(Ki67P)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)elisa檢測試劑盒英文名稱:PPM1A ELISA Kit,英文縮寫:PPM1A,產(chǎn)品別名:Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)ELISA檢測試劑盒,Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
G蛋白偶聯(lián)受體78(GPR78)elisa檢測試劑盒英文名稱:GPR78 ELISA Kit,英文縮寫:GPR78,產(chǎn)品別名:G蛋白偶聯(lián)受體78(GPR78)ELISA檢測試劑盒,G蛋白偶聯(lián)受體78(GPR78)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
ER脂質(zhì)Raft關(guān)聯(lián)蛋白1(ERLIN1)elisa檢測試劑盒英文名稱:ERLIN1 ELISA Kit,英文縮寫:ERLIN1,產(chǎn)品別名:ER脂質(zhì)Raft關(guān)聯(lián)蛋白1(ERLIN1)ELISA檢測試劑盒,ER脂質(zhì)Raft關(guān)聯(lián)蛋白1(ERLIN1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
C-型凝集素域家族4成員K(CLEC4K)elisa檢測試劑盒英文名稱:CLEC4K ELISA Kit,英文縮寫:CLEC4K,產(chǎn)品別名:C-型凝集素域家族4成員K(CLEC4K)ELISA檢測試劑盒,C-型凝集素域家族4成員K(CLEC4K)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Claspin蛋白(CLSPN)elisa檢測試劑盒英文名稱:CLSPN ELISA Kit,英文縮寫:CLSPN,產(chǎn)品別名:Claspin蛋白(CLSPN)ELISA檢測試劑盒,Claspin蛋白(CLSPN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
B-細(xì)胞瘤因子10(Bcl10)elisa檢測試劑盒英文名稱:Bcl10 ELISA Kit,英文縮寫:Bcl10,產(chǎn)品別名:B-細(xì)胞瘤因子10(Bcl10)ELISA檢測試劑盒,B-細(xì)胞瘤因子10(Bcl10)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Arkadia蛋白(ARK)elisa檢測試劑盒英文名稱:ARK ELISA Kit,英文縮寫:ARK,產(chǎn)品別名:Arkadia蛋白(ARK)ELISA檢測試劑盒,Arkadia蛋白(ARK)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
ⅫB組磷脂酶A2(PLA2G12B)elisa檢測試劑盒英文名稱:PLA2G12B ELISA Kit,英文縮寫:PLA2G12B,產(chǎn)品別名:ⅫB組磷脂酶A2(PLA2G12B)ELISA檢測試劑盒,ⅫB組磷脂酶A2(PLA2G12B)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
93kDa核孔蛋白(NUP93)elisa檢測試劑盒英文名稱:NUP93 ELISA Kit,英文縮寫:NUP93,產(chǎn)品別名:93kDa核孔蛋白(NUP93)ELISA檢測試劑盒,93kDa核孔蛋白(NUP93)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
HTh-7細(xì)胞LEO1 RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體規(guī)格 0.1ml
L-enk 亮氨酸腦啡肽抗體規(guī)格 0.1ml
Legumain 半胱氨酸蛋白酶抗體規(guī)格 0.2ml
Lefty/TGF beta 4 轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體TGF β4規(guī)格 0.2ml
LEF-1 增強(qiáng)因子-1抗體規(guī)格 0.1ml
LECT1 白細(xì)胞衍生化學(xué)吸引素抗體規(guī)格 0.2ml
LDOC1/BCUR1 癌癥亮氨酸拉鏈下調(diào)因子1抗體規(guī)格 0.2ml