實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：肺鱗癌細(xì)胞
來源：肺鱗癌；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
肽聚糖識別蛋白1(PGLYRP1)檢測試劑盒英文名稱：PGLYRP1 ELISA Kit碳酸酐酶11抗體包裝5g

胎盤鈣黏蛋白(CDHP)檢測試劑盒英文名稱：CDHP ELISA Kitα酪蛋白抗體包裝100g

羧肽酶N1(CPN1)檢測試劑盒英文名稱：CPN1 ELISA Kit周期調(diào)控相關(guān)蛋白1包裝25g

羧肽酶A3(CPA3)檢測試劑盒英文名稱：CPA3 ELISA Kit間粘附分子1抗體包裝5g

羧基賴氨酸(CML)檢測試劑盒英文名稱：CML ELISA KitCD105抗體包裝25g

髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)檢測試劑盒英文名稱：MPIF2 ELISA Kit軸突蛋白5抗體包裝5g

髓細(xì)胞觸發(fā)受體2(TREM2)檢測試劑盒英文名稱：TREM2 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子COUP1抗體包裝1g

髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM1)檢測試劑盒英文名稱：TREM1 ELISA Kit表皮生長因子樣蛋白1抗體包裝5g

髓分化因子88(MyD88)檢測試劑盒英文名稱：MyD88 ELISA Kit癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體包裝1g

酸性磷酸酶1(ACP1)檢測試劑盒英文名稱：ACP1 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框75抗體包裝5g

酸性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF1)檢測試劑盒英文名稱：FGF1 ELISA Kit隱花色素蛋白1抗體包裝1g

速激肽受體2(TACR2)檢測試劑盒英文名稱：TACR2 ELISA Kit隱花色素蛋白2抗體包裝5g

速激肽受體1(TACR1)檢測試劑盒英文名稱：TACR1 ELISA Kit鈣通道L型α2多肽抗體包裝25g

松弛肽(RLN)檢測試劑盒英文名稱：RLN ELISA KitL型電壓依賴型鈣通道β3(L-type Ca++ CPβ3)抗體包裝5g

四旋蛋白30(TSPAN30)檢測試劑盒英文名稱：TSPAN30 ELISA KitL型電壓依賴型鈣通道β4抗體包裝500g
LK2細(xì)胞點枝頂孢Human HLA-DQB2(HLA class II histocompatibility antigen, DQ beta 2 chain) ELISA KitAlias: HLADQB1|HLADQB2|HLADXB|HLA-DQB2ELISAKitReactivity: Human

小托柄鵝膏菌Human HLA-F ELISA KitAlias: HLA-FELISAKitReactivity: Human

乳酸克魯維酵母Human HIP14/ZDHHC17 ELISA KitAlias: HIP14ELISAKit,ZDHHC17ELISAKitReactivity: Human

洋蔥伯克霍爾德菌Human HIRIP3 ELISA KitAlias: HIRIP3ELISAKitReactivity: Human

海水芽孢桿菌Human hIST1 ELISA KitAlias: hIST1ELISAKitReactivity: Human

鐮刀菌Human HLTF ELISA KitAlias: HLTFELISAKitReactivity: Human

山地青霉Human HLX ELISA KitAlias: HLXELISAKitReactivity: Human

白乳菇Human HIST1H1T ELISA KitAlias: HIST1H1TELISAKitReactivity: Human
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。