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產(chǎn)品名稱：胃癌細胞
來源：胃底癌；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)檢測試劑盒英文名稱：NT3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白64B抗體包裝100g

神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)檢測試劑盒英文名稱：NOS1 ELISA Kit組蛋白H3-K9基轉(zhuǎn)移酶抗體包裝25g

神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)檢測試劑盒英文名稱：NRP1 ELISA Kit趨化素樣因子超家族成員6抗體包裝5g

神經(jīng)纖維素2(NF2)檢測試劑盒英文名稱：NF2 ELISA Kitcornichon樣蛋白抗體包裝100g

神經(jīng)調(diào)節(jié)素4(NRG4)檢測試劑盒英文名稱：NRG4 ELISA KitRas激酶抑制因子連接增強蛋白1抗體包裝25g

神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1)檢測試劑盒英文名稱：NRG1 ELISA KitRas激酶抑制因子連接增強蛋白2抗體包裝500g

神經(jīng)肽Y受體Y5(NPY5R)檢測試劑盒英文名稱：NPY5R ELISA KitRas激酶抑制因子連接增強蛋白3抗體包裝1g

神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)檢測試劑盒英文名稱：NPY2R ELISA Kit分裂周期2樣蛋白激酶5抗體包裝250mg

神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R)檢測試劑盒英文名稱：NPY1R ELISA KitCD20樣蛋白抗體（造血干4跨膜蛋白3）包裝10MG

神經(jīng)肽S(NPS)檢測試劑盒英文名稱：NPS ELISA Kit周期蛋白依賴性激酶CABLES1抗體包裝25g

神經(jīng)肽FF(NPFF)檢測試劑盒英文名稱：NPFF ELISA Kit分裂周期相關蛋白3抗體包裝5g

神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)檢測試劑盒英文名稱：NEF3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白148抗體包裝5mg

神經(jīng)介素S(NMS)檢測試劑盒英文名稱：NMS ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白153抗體包裝1ml

神經(jīng)介素B(NMB)檢測試劑盒英文名稱：NMB ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白160抗體包裝100mg

神經(jīng)激肽B(NKB)檢測試劑盒英文名稱：NKB ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白22抗體包裝25mg
SK-GT-2細胞麥芽糖假絲酵母Human HERC4 ELISA KitAlias: HERC4ELISAKitReactivity: Human

莖點霉屬Human HINFP ELISA KitAlias: HINFPELISAKitReactivity: Human

香菇Human HERPUD2 ELISA KitAlias: HERPUD2ELISAKitReactivity: Human

蘇云金芽孢桿菌殺蟲亞種Human HERC5 ELISA KitAlias: HERC5ELISAKitReactivity: Human

釀酒酵母Human HESX1 ELISA KitAlias: HESX1ELISAKitReactivity: Human

豌豆根瘤菌Human HES5 ELISA KitAlias: HES5ELISAKitReactivity: Human

假黃色單胞菌Human HECTD1 ELISA KitAlias: HECTD1ELISAKitReactivity: Human

毛木耳Human HEXA ELISA KitAlias: HEXAELISAKitReactivity: Human