實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
來源：神經(jīng)母細(xì)胞瘤；雄性；A/J

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
核糖核酸酶A3(RNASE3)檢測試劑盒英文名稱：RNASE3 ELISA Kit22號染色體開放閱讀框15抗體包裝1g

核受體亞家族3C組成員1(NR3C1)檢測試劑盒英文名稱：NR3C1 ELISA Kit22號染色體開放閱讀框13抗體包裝25g

核仁素(NCL)檢測試劑盒英文名稱：NCL ELISA Kit22號染色體開放閱讀框26抗體包裝5g

核仁磷酸蛋白(NPM)檢測試劑盒英文名稱：NPM ELISA Kit補體C2b鏈多肽抗體包裝1g

核連蛋白1(NUCB1)檢測試劑盒英文名稱：NUCB1 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框16抗體包裝5g

核苷酸還原酶M1(RRM1)檢測試劑盒英文名稱：RRM1 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框27抗體包裝25g

和肽素(CPP)檢測試劑盒英文名稱：CPP ELISA Kit磷酸化δ連環(huán)蛋白抗體包裝5g

含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)檢測試劑盒英文名稱：vWA3A ELISA Kit磷酸化δ連環(huán)蛋白抗體包裝1g

含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)檢測試劑盒英文名稱：vWA1 ELISA Kit磷酸化δ連環(huán)蛋白抗體包裝5g

含銅胺氧化酶3(AOC3)檢測試劑盒英文名稱：AOC3 ELISA Kit磷酸化δ連環(huán)蛋白抗體包裝1g

含亮氨酸豐富重復(fù)蛋白3C(LRRC3C)檢測試劑盒英文名稱：LRRC3C ELISA Kit磷酸化δ連環(huán)蛋白抗體包裝5g

含TCP1伴侶蛋白亞基2(CCT2)檢測試劑盒英文名稱：CCT2 ELISA Kit磷酸化δ連環(huán)蛋白抗體包裝25g

含STIP1同源物U-框蛋白1(STUB1)檢測試劑盒英文名稱：STUB1 ELISA Kit22號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g

含IQ基元GTP酶激活蛋白2(IQGAP2)檢測試劑盒英文名稱：IQGAP2 ELISA KitC2CD3蛋白抗體包裝100g

含IQ基元GTP酶激活蛋白1(IQGAP1)檢測試劑盒英文名稱：IQGAP1 ELISA Kit半胱酸蛋白酶蛋白14抗體包裝25g
N1E-115細(xì)胞蠟樣芽孢桿菌Human GNL2 ELISA KitAlias: GNL2ELISAKitReactivity: Human

金黃殼囊孢菌Human GMPR ELISA KitAlias: GMPRELISAKitReactivity: Human

Human GNPAT ELISA KitAlias: GNPATELISAKitReactivity: Human

斑玉蕈Human GMPS ELISA KitAlias: GMPSELISAKitReactivity: Human

金針菇（毛柄菌、冬菇）Human GNA14 ELISA KitAlias: GNA14ELISAKitReactivity: Human

大腸埃希菌Human GNAI1 ELISA KitAlias: GNAI1ELISAKitReactivity: Human

藍(lán)色犁頭霉Human GNAQ ELISA KitAlias: GNAQELISAKitReactivity: Human

葡萄座腔菌Human GNAO1(Guanine nucleotide-binding protein G(o) subunit alpha) ELISA KitAlias: GALPHAo|GNAO|GNAO1ELISAKitReactivity: Human
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。