實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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CA-MO-1細胞
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詳見說明書
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FS-X5161
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產(chǎn)品名稱:急性B**細胞白血病細胞
來源:急性B細胞白血?。荒行?/span>
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)檢測試劑盒英文名稱:8-OHdG ELISA Kit1號染色體開放閱讀框194抗體包裝1g
70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)檢測試劑盒英文名稱:HSPA8 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框198抗體包裝25g
70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)檢測試劑盒英文名稱:HSPA5 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框21抗體包裝5g
70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)檢測試劑盒英文名稱:HSPA1A ELISA Kit1號染色體開放閱讀框216抗體包裝1g
60kD熱休克蛋白(HSPD1)檢測試劑盒英文名稱:HSPD1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框43抗體包裝25g
5羥色胺轉運蛋白(SERT)檢測試劑盒英文名稱:SERT ELISA Kit1號染色體開放閱讀框50抗體包裝5g
5-羥色胺(5-HT)檢測試劑盒英文名稱:5-HT ELISA Kit1號染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)檢測試劑盒英文名稱:5-HIAA ELISA Kit1號染色體開放閱讀框53抗體包裝5g
50kDa核孔蛋白(NUP50)檢測試劑盒英文名稱:NUP50 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框54抗體包裝1ml
27kDa熱休克蛋白(HSPB1)檢測試劑盒英文名稱:HSPB1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框55抗體包裝5g
25-羥基維生素D3(HVD3)檢測試劑盒英文名稱:HVD3 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框56抗體包裝100g
25kDa突觸關聯(lián)蛋白(SNAP25)檢測試劑盒英文名稱:SNAP25 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框65抗體包裝25g
210kDa核孔蛋白(NUP210)檢測試劑盒英文名稱:NUP210 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框64抗體包裝100g
20S-蛋白酶體(20S-PSM)檢測試劑盒英文名稱:20S-PSM ELISA Kit1號染色體開放閱讀框69抗體包裝25g
2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)檢測試劑盒英文名稱:OAS1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框77抗體包裝500g
CA-MO-1細胞腐皮鐮孢菌Human FBXO41 ELISA KitAlias: FBXO41ELISAKitReactivity: Human
新鞘氨醇菌Human FDFT1 ELISA KitAlias: FDFT1ELISAKitReactivity: Human
戊糖片球菌Human FBXO43 ELISA KitAlias: FBXO43ELISAKitReactivity: Human
馬鈴薯炭疽病菌Human FBP2 ELISA KitAlias: FBP2ELISAKitReactivity: Human
雅致小克銀漢霉Human FBXL13 ELISA KitAlias: FBXL13ELISAKitReactivity: Human
大腸埃希菌Human FBXL15 ELISA KitAlias: FBXL15ELISAKitReactivity: Human
短乳桿菌Human FBXL14 ELISA KitAlias: FBXL14ELISAKitReactivity: Human
火木層孔菌Human FBXL16 ELISA KitAlias: FBXL16ELISAKitReactivity: Human
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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