實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產品名稱：膀胱癌細胞
來源：膀胱癌；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

公司細胞現(xiàn)貨供應，質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
二尼柳（標準品）英文名稱： Etodolac8號染色體開放閱讀框74抗體包裝5g

二甘（標準品）英文名稱： Etonogestrel8號染色體開放閱讀框76抗體包裝1g

二苯磺酸拉帕替尼(標準品)英文名稱： Everolimus;RAD0018號染色體開放閱讀框77抗體包裝250mg

二磺酸阿米三（標準品）英文名稱： Fluocinolone Acetonide6號染色體開放閱讀框97抗體包裝5g

二氧芐啶（標準品）英文名稱： Fluocinolone Acetonide補體C7抗體包裝1g

二二氮環(huán)已烷鉑（標準品）英文名稱： Flupirtine maleate7號染色體開放閱讀框10抗體包裝25g

二二異（標準品）英文名稱： Flupirtine maleate7號染色體開放閱讀框45抗體包裝5g

二十酸,花生酸(標準品)英文名稱： Fulvestrant補體C9b抗體包裝1g

二氧六環(huán)（標準品）英文名稱： Gestodene9號染色體開放閱讀框103抗體包裝5g

二乙酰氨乙酸乙二（標準品）英文名稱： Gestodene9號染色體開放閱讀框131抗體包裝1g

二乙酰大黃酸(標準品)英文名稱： Hexareline9號染色體開放閱讀框135抗體包裝5g

法羅培南鈉(標準品)英文名稱： Iloperidone8號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g

法莫替丁(標準品)英文名稱： Iloperidone8號染色體開放閱讀框44抗體包裝25g

反式帕羅西?。藴势罚┯⑽拿Q： Imipenem monohydrate20號染色體開放閱讀框20抗體包裝5g

泛硫乙（標準品）英文名稱： Imipenem monohydrate4號染色體開放閱讀框46抗體包裝100g
KU-19-19細胞蘇云金芽孢桿菌Human C5AR1(C5a anaphylatoxin chemotactic receptor 1) ELISA KitAlias: C5A|C5aR|C5aR|C5AR1|C5R1|CD88ELISAKitReactivity: Human

淡青鏈霉菌Human CA8 (Carbonic anhydrase-related protein) ELISA KitAlias: CA8ELISAKitReactivity: Human

香菇Human BRIP1 (Fanconi anemia group J protein) ELISA KitAlias: BRIP1ELISAKitReactivity: Human

黃色短桿菌Human CABC1 (Atypical kinase COQ8A) ELISA KitAlias: CABC1ELISAKitReactivity: Human

三葉草根瘤菌Human ASTL(Astacin-like metalloendopeptidase) ELISA KitAlias: ASTL|Oocyteastacin|Ovastacin|SAS1BELISAKitReactivity: Human

大腸埃希氏菌Human BAP31 ELISA KitAlias: BAP31ELISAKitReactivity: Human

果生鏈核盤菌Human BCAT1/ECA39 ELISA KitAlias: BCAT1ELISAKit,ECA39ELISAKitReactivity: Human

ParacoccusHuman BubR1 (MAD3/BUB1-related protein kinase) ELISA KitAlias: BubR1ELISAKitReactivity: Human
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。