產(chǎn)品名稱:大鼠肝細(xì)胞
來源:肝;BDVI
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
貨號
|
IAR20細(xì)胞
|
詳見說明書
|
FS-X5227
|
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
賴氨匹林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pitavastatin Calcium /NK-104環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體包裝250mg
賴脯胰島素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pitavastatin Calcium /NK-1043號染色體開放閱讀框30抗體包裝100g
賴諾普利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium iodideCX3CL1抗體包裝1g
蘭索拉唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Praziquan脫羧酶蛋白體36抗體包裝25g
樂卡地平鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Praziquan3號染色體開放閱讀框78抗體包裝5g
雷貝拉唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prazosin HCl過敏素C5a/補(bǔ)體C5a抗體包裝1g
雷米普利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prednisolone acetate卵巢癌抗原抗體包裝5g
雷諾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prednisone Acetate粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體包裝1g
雷帕霉素/西羅莫司(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prednisone Acetate21號染色體開放閱讀框69抗體包裝100g
藜蘆酸(3,4-二氧基苯酸)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pregabalin周期相關(guān)激酶抗體包裝500g
利巴韋林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Procarbazine HCl癌相關(guān)抗原抗體包裝1g
利多卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Procarbazine HCl半胱酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)包裝5g
利伐沙班(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Procaterol HCl周期素依賴性激酶3抗體包裝1g
利福布?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Propofol鈣調(diào)磷酸酶抗體包裝5g
利福霉素SV(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Raloxifene HCl鈣蛋白酶1抗體包裝1g
IAR20細(xì)胞產(chǎn)黃青霉Human KCNA4(Potassium voltage-gated channel subfamily A member 4) ELISA KitAlias: HBK4|HK1|HPCN2|HUKII|KCNA4|KCNA4L|KCNA8|Kv1.4|PCN2ELISAKitReactivity: Human
細(xì)極鏈格孢(可訂購)Human Protein NDRG3(N-myc downstream-regulated gene 3 protein) ELISA KitAlias: NDRG3ELISAKitReactivity: Human
產(chǎn)二素鏈霉菌Human P311(Neuronal protein 3.1) ELISA KitAlias: P311ELISAKitReactivity: Human
托木爾假單胞菌Human TIGAR(TP53-Inducible Glycolysis and Apoptosis Regulator) ELISA KitAlias: C12orf5|chromosome12openreadingframe5|EC3.1.3.46|probablefructose-2|6-bisphosphataseTIGAR|TIGAR|TIGARTP53-inducedglycolysisandapoptosisregulator|transactivatedbyNS3TP2proteinELISAKitReactivity: Human
枯草芽胞桿菌Human anti-CarP(anti-carbamylated protein) ELISA KitAlias: anti-CarPELISAKitReactivity: Human
泛菌屬Human ApoB48 ELISA KitAlias: ApoB48ELISAKitReactivity: Human
鷲峰假絲酵母Human ABHD1 ELISA KitAlias: ABHD1ELISAKitReactivity: Human
派倫霉屬Human EMP3(Epithelial membrane protein 3) ELISA KitAlias: EMP3ELISAKitReactivity: Human