公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
產(chǎn)品名稱(chēng)
|
規(guī)格
|
貨號(hào)
|
FHL124細(xì)胞
|
詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
|
FS-X5261
|
產(chǎn)品名稱(chēng):晶狀體上皮細(xì)胞
來(lái)源:晶狀體上皮;自發(fā)永生
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
胸腺嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sodium ferulic雙特異性蛋白磷酸酶6/絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶3抗體包裝500g
熊去氧膽酸(UDCA)標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱(chēng): Sodium ferulic磷脂蛋白受體Dab1抗體包裝25g
溴肽林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cefditoren pivoxil磷酸化磷脂蛋白受體Dab1抗體包裝5g
溴芬酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cefditoren pivoxil同源轉(zhuǎn)錄因子DLX2抗體包裝5g
溴夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pyrazinamide橋粒糖蛋白2/橋粒糖蛋白3抗體包裝100g
溴化新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pyrazinamide橋粒糖蛋白1抗體包裝25g
溴貝那替(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Demeclocycline hydrochloride肌動(dòng)蛋白解聚因子19抗體包裝5g
亞培南(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Demeclocycline hydrochloride動(dòng)力蛋白激活蛋白1抗體包裝100g
亞藍(lán)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): N-Methyl Paroxetine橋粒芯糖蛋白1包裝25g
亞磷酸氫二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cefquinome sulfate胞漿動(dòng)力蛋白輕鏈1抗體包裝500g
亞葉酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ceftiofur Sodium背根神經(jīng)節(jié)同源蛋白DRGX抗體包裝25g
亞油酸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ceftiofur SodiumDeltaD抗體包裝5g
煙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cytidine-5'-triphosphate(CTP) disodium salt dihydrate神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體包裝100g
胭脂紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Voglibose對(duì)接蛋白3抗體包裝25g
鹽酸阿比朵爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): VogliboseDCN1樣蛋白2抗體包裝5g
FHL124細(xì)胞Human ILDR2(Immunoglobulin-like domain-containing receptor 2) ELISA KitAlias: ILDR2ELISAKitReactivity: Human
冷溫木拉克酵母Human NPY(Neuropeptide Y) ELISA KitAlias: NeuropeptideYELISAKitReactivity: Human
斯氏土地桿菌Human HAS3(Hyaluronan Synthase 3) ELISA KitAlias: HAsynthase3|HAS3|hyaluronansynthase3|Hyaluronatesynthase3|Hyaluronicacidsynthase3ELISAKitReactivity: Human
大腸埃希氏菌Human PRODH(Proline dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA KitAlias: HSPOX2|p53inducedgene6protein|PIG6|POX|POX2|PRODH|PRODH1|PRODH2|Prolineoxidase|Prolineoxidase2|SCZD4|TP53I6ELISAKitReactivity: Human
弗雷德里克斯堡假單胞菌Human DJ-1/PARK 7 ELISA KitAlias: DJ1|DJ1|OncogeneDJ1|PARK7|Parkinsondiseaseprotein7|ProteinDJ1ELISAKitReactivity: Human
克魯斯假絲酵母Human NAC-alpha(Nascent polypeptide-associated complex subunit alpha) ELISA KitAlias: NAC-alphaELISAKitReactivity: Human
小殼焦孢屬Human GRIA1(Glutamate receptor 1) ELISA KitAlias: Glutamatereceptor1ELISAKitReactivity: Human
釀酒酵母Human PARK2(E3 ubiquitin-protein ligase parkin) ELISA KitAlias: E3ubiquitin-proteinligaseparkinELISAKitReactivity: Human