實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

產(chǎn)品名稱：眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞
來源：脈絡(luò)膜黑色素瘤；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
(E)-N-Caffeoylputrescine英文名稱： 6-Benzylamino purine內(nèi)皮特異性分子1抗體包裝5g

(R,S)-告依春英文名稱： Water真核翻譯起始因子3F抗體包裝25g

(R型)人參皂苷Rg2（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Maleic acid真核翻譯起始因子3H抗體包裝5g

(R型)人參皂苷Rg3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ammonium sulfate真核翻譯起始因子4G抗體包裝1g

(R型)人參皂苷Rh1（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cesium chlorideβ4整合素結(jié)合蛋白抗體包裝1g

(R型)人參皂苷Rh2英文名稱： Sodium phosphate, dibasic, heptahydrate食道癌相關(guān)基因4蛋白抗體包裝5g

(S型)人參皂苷Rg3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： dATP 100 mM solution紅**素抗體包裝1g

(S型)人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sodium decanoate胞漿環(huán)氧化物解酶抗體包裝25g

(S型)原人參三英文名稱： Agarose雌受體相關(guān)蛋白3抗體包裝5g

(±)-柚皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Agarose雌相關(guān)受體β抗體包裝100g

1,2,3,4,6-O-沒食子酰葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Phytohemagglutinin上皮膜蛋白2抗體包裝25g

1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-β-D-g...英文名稱： Kinetin,6-Furfurylaminopurine基固羥化酶單加氧酶1抗體包裝500g

1,3-二咖啡?？鼘幩?標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： EGTA, egtazic acid端粒酶結(jié)合蛋白EST1A抗體包裝100g

1,7-雙苯-5-羥基-6-庚烯-3-酮英文名稱： Sodium phosphate, monobasic, anhydrous組蛋白賴氨酸N-基EZH1抗體包裝25g

1,8-桉葉素英文名稱： Sodium lauroyl sarcosine上皮間質(zhì)相互作用蛋白1抗體包裝5g
MUM-2B細(xì)胞大腸桿菌Human PRSS23(Protease, Serine 23) ELISA KitAlias: PRSS23|Serineprotease23|PutativesecretedproteinZsig13ELISAKitReactivity: Human

空腸彎曲桿菌Human RB1(Retinoblastoma Protein 1) ELISA KitAlias: RB1|OSRC|p105-Rb|pp110|OSRC|osteosarcoma|p105-Rb|pp110|pRb|Rb|RB|retinoblastoma1|retinoblastomasuspectibilityprotein|retinoblastoma-associatedproteinELISAKitReactivity: Human

干草鞘氨醇單胞菌Human PRSS33(Protease, Serine 33) ELISA KitAlias: PRSS33|Serineprotease33|SerineproteaseEOSELISAKitReactivity: Human

短裙竹蓀Human PTGIS(Prostaglandin I Synthase) ELISA KitAlias: PTGIS|Prostacyclinsynthase|ProstaglandinI2synthaseELISAKitReactivity: Human

嗜熱脂肪地芽孢桿菌Human REPIN1(Replication Initiator 1) ELISA KitAlias: REPIN1|Zincfingerprotein464|DHFRoribeta-bindingproteinRIP60|ATT-bindingprotein|60kDaorigin-specificDNA-bindingprotein|60kDareplicationinitiationregionprotein|RIP60|ZNF464ELISAKitReactivity: Human

Roseivivax lentusHuman PTP1B(protein tyrosine phosphatase 1B) ELISA KitAlias: PTP1B|PTPN1|Tyrosine-proteinphosphatasenon-receptortype1|Protein-tyrosinephosphatase1B|PTP-1B|PTP1B|proteintyrosinephosphatase1B|proteintyrosinephosphatase|non-receptortype1|PTP1Bproteintyrosinephosphatase|placentalELISAKitReactivity: Human

栗疫菌Human RIPK2(Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA KitAlias: RIPK2ELISAKitReactivity: Human

假芝Human RLN2(Relaxin-2) ELISA KitAlias: RLN2|ProrelaxinH2|RLN2|RLXH2|bA12D24.1.1|bA12D24.1.1|bA12D24.1.2|bA12D24.1.2|H2|H2|relaxin2|RLXH2|RLXH2ELISAKitReactivity: Human
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。