產(chǎn)品名稱：急性髓系白血病細胞
來源：兒童急性髓系白血病

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

公司細胞現(xiàn)貨供應，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)???可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

白頭翁皂苷E英文名稱： Nickel (II) fluoride tetrahydrate上皮膜蛋白3抗體包裝5g

白頭翁皂苷E-1英文名稱： Silicon (IV) oxide膜蛋白EVC2抗體包裝1g

白頭翁皂苷E-2英文名稱： Strontium fluoride哺乳動物室管膜相關(guān)蛋白1抗體包裝5g

白頭翁皂苷E-3英文名稱： Syringaldehyde內(nèi)皮粘附分子抗體包裝10g

白土苓(短柱肖菝契)（標準品）英文名稱： Tetrazolium violet上皮有絲分裂蛋白抗體包裝50g

白土苓(華南肖菝葜)（標準品）英文名稱： 2-MethylindoleEmerin蛋白抗體包裝25g

白薇（標準品）英文名稱： Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體包裝5g

白鮮堿(標準品)英文名稱： AMP buffer concentrate磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員5抗體包裝1g

白鮮皮（標準品）英文名稱： Benzimidazole早期生長反應蛋白2抗體包裝25g

白楊素(標準品）英文名稱： Carboxypeptidase B磷酸化雌受體β抗體包裝5g

白楊素-7-O-龍膽二糖苷英文名稱： Cobalt (II) carbonate, hydrate乙激酶β抗體包裝1g

白英（標準品）英文名稱： dTDP微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2抗體包裝5g

白芷（標準品）英文名稱： Galactose oxidase減數(shù)分裂內(nèi)切酶EME1抗體包裝1g

百部(對葉百部)（標準品）英文名稱： Iron (II) oxalate, dihydrate延伸突觸蛋白2抗體包裝25g

百部（直立百部）（標準品）英文名稱： Lead (II) chloride延伸突觸蛋白1抗體包裝5g
EU-2細胞叢毛單胞菌Human NPYR1(Neuropeptide Y Receptor Y1) ELISA KitAlias: NPYR1ELISAKitReactivity: Human

戊糖片球菌Human MYH10(Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle) ELISA KitAlias: MYH10|MyosinHeavyChain10|NonMuscle|NMMHC-IIB|NMMHCBELISAKitReactivity: Human

流產(chǎn)布魯氏菌 生物Ⅵ型Human NPYR2(Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA KitAlias: NPYR2ELISAKitReactivity: Human

變紫青霉Human MYL1(Myosin Light Chain 1, Alkali, Fast Skeletal) ELISA KitAlias: MYL1|MyosinLightChain1|Alkali|FastSkeletalELISAKitReactivity: Human

尖孢鐮刀菌胡麻?；?/span>Human NAP(Neutrophil Alkaline Phosphatase) ELISA KitAlias: NAP|NeutrophilAlkalinePhosphataseELISAKitReactivity: Human

梨形毛霉Human NAGase(N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase) ELISA KitAlias: NAGase|N-Acetylhexosaminidase|beta-D-N-acetylhexosaminidase|beta-N-acetyl-D-hexosaminidaseELISAKitReactivity: Human

屎腸球菌Human MUC13(Mucin 13) ELISA KitAlias: MUC13|Mucin13ELISAKitReactivity: Human

中慢生華癸根瘤菌Human MHCC/HLA-C(Major Histocompatibility Complex Class I C) ELISA KitAlias: MHCC|HLA-CELISAKitReactivity: Human

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