產(chǎn)品名稱：膀胱癌細(xì)胞
來源：膀胱癌；結(jié)轉(zhuǎn)移；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍??培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

江南卷柏（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fmoc chlorideβ腎上腺素能受體激酶2抗體包裝25g

江藤苷英文名稱： Florisil®腺苷酸環(huán)化酶Gα蛋白/Gαs/olf抗體包裝5g

姜黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Magnesium silicate adsorbent(Synthetic)周期蛋白G相關(guān)激酶抗體包裝1g

姜黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fluazifop-P-butyl solution糖基轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1抗體包裝5g

姜酮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱：  Famoxadone solution環(huán)指蛋白27抗體包裝1g

降二氫辣椒堿英文名稱： Flufenoxuron透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg

降香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： FomesafenG蛋白偶聯(lián)受體激酶6抗體包裝5g

膠蒼術(shù)甙，羧基蒼術(shù)苷二鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： FlutolanilRho GTP酶激活蛋白26抗體包裝1g

焦地黃苯乙甙A1英文名稱： FlusilazoleG蛋白α抑制蛋白1抗體包裝25g

焦地黃苯乙甙B1英文名稱： Fipronil生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6抗體包裝5g

焦性沒食子酸（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fenobucarb谷胱甘肽合成酶抗體包裝100ml

絞股藍(lán)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fenpyroximate血型糖蛋白δ抗體包裝500ml

絞股藍(lán)皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Fenoxaprop-p-ethyl糖皮質(zhì)誘導(dǎo)亮氨酸拉鏈蛋白抗體包裝25g

絞股藍(lán)皂苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Amberlite® IRC-748γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶6抗體包裝5g

絞股藍(lán)皂苷XLIX（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Amberlyst 15 ion-exchange resinG氨基丁酸受體δ/GABAA Rδ抗體包裝1g
253J-BV細(xì)胞黃綠木霉Human ASGR2(Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA KitAlias: ASGR2ELISAKitReactivity: Human

不產(chǎn)色鏈霉菌Human ASK-1(Apoptosis Signal Regulating Kinase 1) ELISA KitAlias: ASK-1|MAP3K5|MEKK5|Apoptosissignal-regulatingkinase1|ASK-1|ASK1MEKK5|EC2.7.11|MAP|ERKkinasekinase5|MAPK|ERKkinasekinase5|MAPKKK5EC2.7.11.25|MEKkinase5|MEKK5apoptosissignalregulatingkinase1|mitogen-activatedproteinkinasekinasekinase5ELISAKitReactivity: Human

副豬嗜血桿菌Human AP17(Apelin 17) ELISA KitAlias: AP17(Apelin17)ELISAKitReactivity: Human

意大利青霉Human AP13(Apelin 13) ELISA KitAlias: AP13(Apelin13)ELISAKitReactivity: Human

短芽孢桿菌Human AP(Allopregnanolone) ELISA KitAlias: AP|3α|5α-tetrahydroprogesterone|3α-hydroxy-5α-pregnan-20-oneELISAKitReactivity: Human

杏鮑菇Human ANG II R1-Ab(Angiotensin II Receptor 1 Antibody) ELISA KitAlias: ANGIIR1-AbELISAKitReactivity: Human

鴨疫里氏桿菌Human ANG II(Angiotensin II) ELISA KitAlias: ANGIIELISAKitReactivity: Human

林生地霉Human ANGPTL1(Angiopoietin Like Protein 1) ELISA KitAlias: ANGPTL1ELISAKitReactivity: Human

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