公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱：腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞
來(lái)源：膠質(zhì)瘤；男性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

羅漢果皂苷Ive(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Dimethyl sulfoxide磷酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體包裝1g

羅漢果皂苷V(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ethylene glycolGATA結(jié)合蛋白6抗體包裝25g

羅漢果皂苷ⅡA2英文名稱： Glycerol in water for HPLC verificationGLP-1單克隆抗體包裝5g

羅漢果皂苷ⅢA1英文名稱： Lithium carbonate顆粒酶B抗體包裝25g

羅漢果皂苷Ⅲe英文名稱： Neocuproine hydrochloride monohydrateG蛋白偶聯(lián)受體30抗體包裝5g

羅漢松樹(shù)脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Potassium bromide神經(jīng)節(jié)苷脂誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白2抗體包裝100g

羅通定/延胡索乙素/四氫巴馬汀(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Arsenazo I Hydrate3-磷酸甘油脫氫酶包裝25g

蘿卜硫素；萊菔硫烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sodium sulfate anhydrousGDNF家族受體α-1抗體包裝5g

裸花紫珠（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dimethyl sulfone運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝1g

絡(luò)塞定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1,3-Propanediol葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體包裝100mg

絡(luò)塞琳（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DHA葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝10mg

絡(luò)塞維（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dimetridazole磷酸化糖皮質(zhì)受體抗體包裝100g

絡(luò)石苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Penicillin V potassium saltG蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體包裝1g

絡(luò)石藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-NP-AOZγ連環(huán)蛋白/Catenin γ /γ鏈接素抗體包裝5g

絡(luò)緦（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： SulfacetamideG1氨基丁酸A型受體相似蛋白2抗體包裝1g
T98細(xì)胞球毛殼菌Human MT-CO1(Cytochrome c oxidase subunit 1) ELISA KitAlias: MT-CO1|CytochromecoxidasepolypeptideIELISAKitReactivity: Human

茶樹(shù)菇Human LAMB1(Laminin subunit beta-1) ELISA KitAlias: LAMB1|CLM|Laminin-6subunitbeta|Laminin-2subunitbeta|Laminin-12subunitbeta|Laminin-10subunitbeta|Laminin-8subunitbeta|LamininB1chain|Laminin-1subunitbetaELISAKitReactivity: Human

潰瘍棒狀桿菌Human FBN2(Fibrillin-2) ELISA KitAlias: FBN2ELISAKitReactivity: Human

羅磷傘Human TGFBR1(TGF-beta receptor type-1) ELISA KitAlias: TGFBR1|AAT5|ALK5|MSSE|SKR4|ALK-5|LDS1A|LDS2A|TGFR-1|ACVRLK4|Transforminggrowthfactor-betareceptortypeI(TGF-betareceptortypeI|TbetaR-I)|TGF-betatypeIreceptor|Serine|threonine-proteinkinasereceptorR4(SKR4)|ActivinAreceptortypeII-likeproteinkinaseof53kD|Activinreceptor-likekinase5(ALK-5|ALK5)|Activinreceptor-likekinase5|ACVRLK4|ALK-5ALK5|LDS1A|LDS2A|Serine|threonine-proteinkinasereceptorR4|SKR4|tbetaR-I|TbetaR-I|TGF-betareceptortypeI|TGF-betatypeIreceptor|TGFR-1|transforminggrowthfactorbetareceptorI|Transforminggrowthfactor-betareceptortypeIELISAKitReactivity: Human

赭綠青霉Human PRKCE(Protein kinase C epsilon type) ELISA KitAlias: PKCε(ProteinKinaseCEpsilon)|PRKCE|PKCE|nPKC-epsilon|MGC125656|PKCEMGC125657|proteinkinaseCepsilontype|proteinkinaseC|epsilonELISAKitReactivity: Human

癤葡萄座腔菌Human PRKCG(Protein kinase C gamma type) ELISA KitAlias: PRKCG|PKCC|PKCG|SCA14|PKC-gamma|MGC57564|PKCCSCA14|PKCGproteinkinaseCgammatype|proteinkinaseC|gammaELISAKitReactivity: Human

馬拉交替紅色桿菌Human NRGN(Neurogranin) ELISA KitAlias: NRGN|RC3|hngELISAKitReactivity: Human

黃綠木霉Human IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) ELISA KitAlias: IFITM10|DispaninsubfamilyAmember3ELISAKitReactivity: Human

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