實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：結(jié)腸腺癌細胞
來源：結(jié)腸腺癌；女性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
毛鉤藤堿英文名稱： (E)-2-ButenalG蛋白γ13/Gγ13 抗體包裝1g

毛訶子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DodecaneG蛋白γ5/Gγ5 抗體包裝1g

毛花苷C英文名稱：  Decanoic acidG蛋白γ 1/Gγ 1 抗體包裝250mg

毛蘭素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dimethyl adipate鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白2抗體包裝5g

毛里求斯排草素英文名稱： Dibutyl maleate鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白3樣蛋白抗體包裝100ml

毛兩面針?biāo)赜⑽拿Q： Dimethyl sulfoxide溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體包裝500ml

毛蕊異黃酮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： n-Decyl alcohol溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體包裝100g

毛蕊異黃酮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Diethyl succinate促性腺釋放2抗體包裝25g

茅膏菜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Diethyl sebacate氨基葡萄糖6-硫酸酯酶抗體包裝500g

沒食子兒茶素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Docosane高爾基體膜相關(guān)蛋白抗體包裝1g

沒食子兒茶素沒食子酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dotriacontane高爾基體膜相關(guān)蛋白5抗體包裝25g

沒食子酸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 1-Heptanol高爾基體膜相關(guān)蛋白7抗體包裝5g

沒食子酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 4-Hydroxybutanoic acid lactone高爾基復(fù)合體CFR1抗體包裝100g

沒食子酸一物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： γ-Heptalactone高爾基體蛋白97抗體包裝25g

沒食子酰芍藥苷英文名稱： (+)-Fenchone高爾基體蛋白A亞基4抗體包裝100mg
Co-115細胞葡萄擬莖點霉Human EFHD2(EF-hand domain-containing protein D2) ELISA KitAlias: EFHD2|SWS1|Swiprosin-1ELISAKitReactivity: Human

灰葡萄孢(測序正確）Human C9orf140(Protein C9orf140) ELISA KitAlias: C9orf140|TS|MDEP|Tumorspecificityandmitosisphase-dependentexpressionprotein|p42.3ELISAKitReactivity: Human

根瘤菌Human TNFRSF12A(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A) ELISA KitAlias: TNFRSF12A|Fn14|TNFRSF12|CD266|CD266antigen|FGF-inducible14|Fibroblastgrowthfactor-inducibleimmediate-earlyresponseprotein14|FN14tumornecrosisfactorreceptorsuperfamilymember12A|tumornecrosisfactorreceptorsuperfamily|member12A|TWEAKR|TweakR|Tweak-receptor|tweak-receptor|typeItransmembraneproteinFn14ELISAKitReactivity: Human

鹽地喜鹽芽孢桿菌Human TEC(Tyrosine-protein kinase Tec) ELISA KitAlias: TEC|PSCTK4|EC2.7.10|EC2.7.10.2|MGC126760|MGC126762|tyrosine-proteinkinaseTec|tecproteintyrosinekinaseELISAKitReactivity: Human

根霉菌Human CDH6(Cadherin-6) ELISA KitAlias: CDH6|K-Cadherin|cadherin6|type2|K-cadherin(fetalkidney)|cadherin|fetalkidney|cadherin-6|KCAD|K-cadherin|K-cadherin(fetalkidney)ELISAKitReactivity: Human

*豬苓Human MC5R(Melanocortin receptor 5) ELISA KitAlias: MC5R|MC5-R|MC-2|MC-2|MC5-R|melanocortin5receptor|melanocortinreceptor5|melanocortin-5receptorELISAKitReactivity: Human

粘質(zhì)沙雷氏菌Human MSH2(DNA mismatch repair protein Msh2) ELISA KitAlias: MSH2|MSH2|COCA1|FCC1|HNPCC|HNPCC1|LCFS2|MutSproteinhomolog2|LCFS2|DNAmismatchrepairproteinMsh2|hMSH2|HNPCC1mutS(E.coli)homolog2(coloncancer|nonpolyposistype1)|LCFS2|mutShomolog2|coloncancer|nonpolyposistype1(E.coli)|MutSproteinhomolog2ELISAKitReactivity: Human

丁香鏈霉菌Human ARC(Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) ELISA KitAlias: ARC|ARG3.1|mArc|Activity-regulatedgene3.1proteinhomologELISAKitReactivity: Human
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

產(chǎn)品留言

標(biāo)題

聯(lián)系人

聯(lián)系電話

內(nèi)容

驗證碼

點擊換一張

注：1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發(fā)送信息!
2.如有必要,請您留下您的詳細聯(lián)系方式!