公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱(chēng)：近端腎小管上皮細(xì)胞
來(lái)源：近端腎小管；上皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

明黨參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Nonoic acid甘氨酰核苷酸合成酶抗體包裝250mg

莫諾苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Naphthalene-d8生長(zhǎng)休止特定蛋白2抗體包裝1g

墨旱蓮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： PentacosaneG蛋白γ11/Gγ11 抗體包裝5g

母丁香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： 9,10-Dimethylanthracene磷酸化肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體包裝1g

牡丹皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： 9,10-Diphenylanthraceneγ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶7重鏈抗體包裝25g

牡丹皮苷C英文名稱(chēng)： Diphenyl sulfide生長(zhǎng)2/胎盤(pán)特異性生長(zhǎng)抗體包裝5g

牡荊素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： 4,4′-Diaminodiphenyl ether高爾基體相關(guān)蛋白GM130抗體包裝25mL

牡荊素-4''-O-葡萄糖苷英文名稱(chēng)： Docosane胃泌素抑制肽受體抗體包裝1g

牡荊素葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： 4,4'-Thiodianiline粒-巨噬集落激因子受體α抗體包裝250mg

牡荊素鼠李糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)：  γ-Dodecalactone谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因抗體包裝5g

木鱉子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Fenoxaprop-P接頭蛋白Gab 2抗體包裝5g

木芙蓉葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： 6-Hydroxynicotinic Acid葡萄糖6磷酸酶α/G6Pase-α抗體包裝1g

木瓜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： 1-Heptanol糖磷脂酰肌抗體包裝5g

木蝴蝶苷A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Indene乙二酶1抗體包裝1g

木蝴蝶苷B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Eicosane核呼吸因子2抗體包裝250mg
hRPTC細(xì)胞仁果叢梗孢Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA KitAlias: HOGA1|DHDPSL|DHDPS-likeprotein|ProbableKHG-aldolase|Protein569272|Dihydrodipicolinatesynthase-like|Probable2-keto-4-hydroxyglutaRatealdolaseELISAKitReactivity: Human

枯草芽孢桿菌Human UNC5C(Netrin receptor UNC5C) ELISA KitAlias: UNC5C|UNC5H3|netrinreceptorUNC5C|Proteinunc-5homolog3|Proteinunc-5homologC|unc-5homolog3|unc-5homologC(C.elegans)|UNC5H3unc5(C.eleganshomolog)cELISAKitReactivity: Human

美澳型核果褐腐病菌Human SUSD2(Sushi domain-containing protein 2) ELISA KitAlias: SUSD2ELISAKitReactivity: Human

橄欖色盤(pán)多毛孢Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA KitAlias: MTPAP|PAPD1|PAP|TUTase1|mtPAP|Terminaluridylyltransferase1|PAP-associateddomain-containingprotein1|PolynucleotideadenylyltransferaseELISAKitReactivity: Human

黑曲霉Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA KitAlias: ZNF654|Melanoma-associatedantigenELISAKitReactivity: Human

白地霉Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA KitAlias: ERN1|IRE1|IRE1a|Ire1-alpha|hIRE1p|Endoplasmicreticulum-to-nucleussignaling1|Inositol-requiringprotein1|Serine|threonine-proteinkinase|endoribonucleaseIRE1ELISAKitReactivity: Human

岸海桿狀菌Human COQ10A(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog A, mitochondrial) ELISA KitAlias: COQ10AELISAKitReactivity: Human

Human PIN1(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1) ELISA KitAlias: PIN1|dod|DOD|UBL5|peptidyl-prolylcis|transisomerase|NIMA-interacting|peptidylprolylcis|transisomerase|NIMA-interacting1|peptidyl-prolylcis-transisomeraseNIMA-interacting1|Peptidyl-prolylcis-transisomerasePin1|PPIasePin1|prolylisomerase|protein(peptidyl-prolylcis|transisomerase)NIMA-interacting1|protein(peptidylprolylcis|transisomerase)NIMA-interacting1|RotamasePin1ELISAKitReactivity: Human