產(chǎn)品名稱：腎癌細(xì)胞
來源：腎透明細(xì)胞癌；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

山茱萸（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole] DNA復(fù)制抑制因子抗體包裝5g

山茱萸新苷I英文名稱： N-(1-Pyrenyl)maleimideG蛋白α抑制蛋白2抗體包裝25g

珊瑚菜內(nèi)酯，珊瑚菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： AlvimopanG蛋白偶聯(lián)受體γ4抗體包裝5g

珊瑚姜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Myristyl sulfobetaineG氨基丁酸B型受體2抗體包裝1g

商陸皂苷T英文名稱： 3-(N,N-Dimethylpalmitylammonio)propanesulfonate(SHDAB)葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體（熱休克蛋白70蛋白5）包裝250mg

商陸皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Lithium Dodecyl Sulfate葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體包裝1mg

商陸皂苷辛英文名稱： Sulfobetaine 8糖原合酶激酶-3β抗體包裝10MG

芍藥苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sulfobetaine 10糖原合酶激酶-3β抗體包裝25g

芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sulfobetaine 12,SDDAB三磷酸鳥苷環(huán)解酶抗體包裝1g

蛇床子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Entacapone促代謝型谷氨酸受體5抗體包裝5g

蛇床子素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Triton X-114生長調(diào)節(jié)致癌基因-1抗體GROa包裝100g

蛇膽汁（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Triton X-405G蛋白偶合受體激酶1抗體包裝500g

射干（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CHAPS促胃泌素釋放肽抗體包裝100g

麝香酮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CHAPSO磷酸化G蛋白通路抑制蛋白1抗體包裝25g

伸筋草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1,4-Dithioerythritol 腦糖原磷酸化酶抗體包裝5g
KRC/Y細(xì)胞蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Human GP5(Platelet glycoprotein V) ELISA KitAlias: GP5|CD42d|GP5|GPV|plateletglycoproteinV|CD42d|glycoproteinV(platelet)|GPVELISAKitReactivity: Human

繡色土生單胞菌Human KL(Klotho) ELISA KitAlias: KL|klotho|KLOTHOELISAKitReactivity: Human

白鬼筆Human ULBP2(NKG2D ligand 2) ELISA KitAlias: ULBP2|ALCAN-alpha|N2DL2|NKG2DL2|RAET1H|ALCAN-alpha|N2DL2|N2DL-2|NKG2Dligand2|RAET1HNKG2DL2|retinoicacidearlytranscript1H|Retinoicacidearlytranscript1H|UL16bindingprotein2|UL16-bindingprotein2ELISAKitReactivity: Human

叢毛紅曲Human SEPT5(Septin-5) ELISA KitAlias: SEPT5|Celldivisioncontrol-relatedprotein1|CDCrel-1|Peanut-likeprotein1|PNUTL1ELISAKitReactivity: Human

惡臭假單胞菌Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA KitAlias: TPH2|Neuronaltryptophanhydroxylase|Tryptophan5-monooxygenase2|ELISAKitReactivity: Human

斑污擬盤多孔孢Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA KitAlias: TPH1|TPRH|indoleaceticacid-5-hydroxylase|L-tryptophanhydroxylase|tryptophan5-hydroxylase1|Tryptophan5-monooxygenase1|tryptophanhydroxylase(tryptophan5-monooxygenase)|tryptophanhydroxylase1ELISAKitReactivity: Human

間型酒香酵母Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA KitAlias: NDST2|bifunctionalheparansulfateN-deacetylase|N-sulfotransferase2|GlucosaminylN-deacetylase|N-sulfotransferase2|N-deacetylase|N-sulfotransferase(heparanglucosaminyl)2|NDST-2|N-heparansulfatesulfotransferase2|N-HSST2|NST2ELISAKitReactivity: Human

麥根腐平臍孺孢Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA KitAlias: GAS1|GAS-1|growtharrest-specific1|Growtharrest-specificgene-1|growtharrest-specificprotein1ELISAKitReactivity: Human