公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱：小鼠肺成纖維細(xì)胞
來(lái)源：BSL-1

培養(yǎng)基：DMEM高糖90%，胎牛血清10%（1521/1531）

狀態(tài)：成纖維細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

血竭素高酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Cysteine methyl ester hydrochloride高密度脂蛋白抗體包裝10MG

鴉膽子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glycine methyl ester hydrochloride蛋白激酶底物相關(guān)蛋白抗體包裝5MG

鴉膽子苦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Glutamic acid dimethyl ester hydrochloride艾滋病病抗體包裝1g

鴉膽子素D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Leucine methyl ester hydrochloride流感病H3N2血凝素抗體包裝250mg

鴨腳樹葉堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Phenylalanine methyl ester hydrochloride人瘤病16型L2抗體包裝5g

鴨跖草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Proline methyl ester hydrochlorideA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝1g

亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Serine methyl ester hydrochloride蛭素抗體包裝25g

亞麻木酚素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Tryptophan methyl ester hydrochloride副腫瘤綜合癥小腦變性相關(guān)蛋白抗體包裝5g

煙堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Tyrosine methyl ester 植物熱休克蛋白93抗體包裝25g

延胡索（元胡）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Cysteine ethyl ester hydrochloride重組人瘤病抗體包裝5g

延胡索素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： H-Phe-OEt.HCl長(zhǎng)鏈烯脂酰輔酶A脫氫酶抗體包裝25g

延胡索乙素；消旋延胡索乙素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Glycine ethyl ester hydrochloride羥輔酶A脫氫酶β抗體包裝5g

延齡草苷；地索苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Methionine ethyl ester hydrochloride三羥基三基輔酶A裂解酶抗體包裝1g

芫花素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 高密度脂蛋白抗體包裝250mg

芫花條（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Aspartic acid β-benzyl ester磷酸化三羥基三基輔酶A還原酶抗體包裝1g
B82細(xì)胞虎皮粘蓋牛肝菌Human APLN36(Apelin-36) ELISA KitAlias: AP36(Apelin36)ELISAKitReactivity: Human

枯草芽孢桿菌Human MT2A(Metallothionein-2) ELISA KitAlias: MT2(Metallothionein-2)|MT2A|CES1|MT-2|MT-II|Metallothionein-2A|Metallothionein-IIELISAKitReactivity: Human

松針散斑殼Human NRG-1(Neuregulin 1) ELISA KitAlias: NRG-1(Neuregulin1)|Heregulin-1|HGL|HRG1-alpha|HRG1-beta1|NRG1|ARIA|GGF2|GGF|glialgrowthfactor|HGLneudifferentiationfactor|HRG|HRG1|HRGA|neuregulin1typeIVbeta1a|MST131|MSTP131|NDFheregulin|alpha(45kD|ERBB2p185-activator)|neuregulin1|neuregulin1typeIVbeta3|pro-neuregulin-1|membrane-boundisoform|pro-NRG1|sensoryandmotorneuronderivedfactor|SMDFELISAKitReactivity: Human

枯草芽孢桿菌Human TUBB(Tubulin beta chain) ELISA KitAlias: TUBβ(β-Tubulin)|TUBB|OK|SW-cl.56|TUBB5|Tubulinbetachain|Tubulinbeta-5chainELISAKitReactivity: Human

大腸埃希氏菌Human MUCL1(Mucin-like protein 1) ELISA KitAlias: MUCL1(Mucin-likeprotein1)|SBEM|ProteinBS106|SmallbreastepithelialmucinELISAKitReactivity: Human

嚙蝕艾肯氏菌Human CD3E(T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain) ELISA KitAlias: CD3E(T-cellsurfaceglycoproteinCD3epsilonchain)|CD3e|CD3eantigen|CD3eantigen|epsilonpolypeptide(TiT3complex)|CD3emolecule|epsilon(CD3-TCRcomplex)|CD3-epsilon|T3E|T-cellantigenreceptorcomplex|epsilonsubunitofT3|T-cellsurfaceantigenT3|Leu-4epsilonchain|TCREELISAKitReactivity: Human

星孢鏈霉菌Human ERCC1(DNA excision repair protein ERCC-1) ELISA KitAlias: ERCC1(ExcisionRepairCrossComplementingRodentRepairDeficiencyComplementation1)|DNAexcisionrepairproteinERCC-1ELISAKitReactivity: Human

大腸埃希氏桿菌Human NRP1(Neuropilin-1) ELISA KitAlias: NRP1(Neuropilin1)|BDCA-4|CD304|BDCA4|CD304antigen|neuropilin1|neuropilin-1|NRPNP1|transmembranereceptor|Vascularendothelialcellgrowthfactor165receptor|VEGF165RELISAKitReactivity: Human