產(chǎn)品名稱：人偏肺病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-01P99969
操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1、公司產(chǎn)品僅用于科研不需要單獨(dú)純化線粒體，柱式法純化，操作簡(jiǎn)單快捷。

2、得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。

3、每107個(gè)動(dòng)物細(xì)胞一般能得到100ng左右的mtDNA，每克組織一般能得到3～5μg mtDNA。

注意：本產(chǎn)品只適合于動(dòng)物材料，不適合于植物材料，因?yàn)橹参锞€粒體DNA一般都十分巨大,非常難提。

產(chǎn)品組成:

使用方法:

一:培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)處理

1. 用自備的0.25%胰酶消化液處理約107個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞,離心收集后棄上清。

2. 用PBS或TBS等緩沖液洗滌細(xì)胞兩次,離心得到的細(xì)胞沉淀直接用于mtDNA提取。

二:組織細(xì)胞預(yù)處理

3. 用剪刀將1g新鮮的動(dòng)物組織剪碎(芝麻大小*),轉(zhuǎn)移到1.5mL塑料離心管中,用于mtDNA提取。注意:*不要使用凍存的動(dòng)物組織,因?yàn)閮瞿^(guò)程中形成的冰晶會(huì)將線粒體刺破,使其DNA釋放出來(lái)被胞漿中的DNA酶降解,影響回收率。

三:血液預(yù)處理

4. 將3-5mL抗凝外周血靜置30分鐘或低速離心5分鐘,取白細(xì)胞層。

5. 用自備PBS洗滌白細(xì)胞兩次,得到的白細(xì)胞沉淀用于mtDNA提取。

柱式動(dòng)物線粒體DNA提取試劑盒(PCR級(jí))四:mtDNA提取

5.在細(xì)胞沉淀或剪碎的組織中加入250μL冰浴的溶液A,充分吹打分散。如果是剪碎的組織,不要等成塊的組織溶解即可繼續(xù)下步操作。

6. 加入250μL常溫的溶液B(如果溶液B有沉淀,用前須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用),溫和反復(fù)顛倒混勻10次。千萬(wàn)不要?jiǎng)×艺袷帯?/span>

7. 冰上放置6-8分鐘。注意不要超過(guò)8分鐘。

8. 加入350μL冰浴的溶液C,溫和混勻4-6次,可見(jiàn)白色沉淀物產(chǎn)生,然后放冰上放置20-25分鐘。

9.室溫12000~15000g離心10分鐘,小心將上清液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。由于此時(shí)的溶液比重較大,有時(shí)候出現(xiàn)沉淀漂浮是正常現(xiàn)象,取上清時(shí)避開(kāi)漂浮的沉淀即可。

10. 靜置5分鐘以讓DNA與離心吸附柱充分結(jié)合,此步十分重要。

11.室溫12000~15000g離心1分鐘,棄收集管中的廢液。

12. 加入500μL的通用洗柱液,室溫12000~15000g離心1分鐘,棄收集管中廢液。

注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要將蓋擰緊存放,否則乙醇會(huì)揮發(fā)。

13. 重復(fù)上步1次。

14.室溫12000~15000g離心1分鐘,甩干殘留液體。此步不能省略,否則殘留乙醇會(huì)影響DNA的后續(xù)使用(如DNA上樣時(shí)不能沉淀到加樣孔中)。

15. 將離心吸附柱置于一個(gè)新的1.5mL塑料離心管中,加入30-50μL 65-80℃預(yù)熱的DNA洗脫液,室溫放置2分鐘。常溫的DNA洗脫液也可以用于洗脫,但產(chǎn)量稍微有所降低。

16.室溫12000~15000g離心1分鐘,離心管底溶液即mtDNA。

17. 由于本公司離心吸附柱結(jié)合DNA能力較強(qiáng),如果再加30-50μL DNA洗脫液到離心吸附柱中,往往還能洗脫下很多mtDNA(相當(dāng)于次洗脫的20-30%),但注意不要使用上步得到的mtDNA溶液來(lái)洗脫。

18. 12000~15000g離心1分鐘,離心管底溶液即線粒體DNA。每107個(gè)動(dòng)物細(xì)胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克組織一般能得到3-5μg mtDNA。如果DNA需要濃縮,可以使用本公司的核酸濃縮劑。

19. 由于DNA機(jī)械斷裂,電泳時(shí)DNA可能不呈現(xiàn)專一的帶,但此mtDNA溶液可以直接用于PCR。下列是公司正熱銷的產(chǎn)品：
Ai-phospho-CaMK2a(pTyr231) /FITC 熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠等磷suan化鈣/鈣調(diào)su依賴蛋白激mei2α抗體IgGMulti-class aibodies： 0.2ml

Rabbit Ai-Guinea IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)Multi-class aibodies： 2ml

凝血mei原mei抗體/纖維介su蛋白/前凝血su抗體 Ai-fgl2 0.1ml

Goat Ai-Mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FOPNL 英文名稱： 胚胎干細(xì)胞相關(guān)蛋白FOPNL抗體 0.2ml

Rhesus aibody Rh phospho-STAT6(Thr645) 磷suan化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體  0.1ml

Rabbit Ai-Guinea IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)Multi-class aibodies： 2ml

MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5) 多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原Multi-class aibodies： 0.5mg

Ai-Annexin I 膜粘連蛋白 I抗體Multi-class aibodies： 0.1ml

Rhesus aibody Rh phospho-Bcl-xL/BCL2L1(Thr115) 磷suan化Bcl-xL蛋白抗體  0.1ml

品名  備注

VEGF 英文名稱： 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml

DNase gamma 英文名稱： 脫氧核糖核suanmeiγ抗體 0.2ml

Ai-Annexin I 膜粘連蛋白 I抗體Multi-class aibodies： 0.1ml

SLK 英文名稱： 酪suan蛋白激meiFyn(同步原癌基因)抗體 0.2ml

EST1A 英文名稱： 端粒mei結(jié)合蛋白EST1A抗體 0.2ml

微管蛋白抗體 Ai-Tubulin-α 0.1ml

Ai-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC 熒光su標(biāo)記磷suan化酪氨suan激meiA抗體IgGMulti-class aibodies： 0.2ml

Rhesus aibody Rh Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1345) 磷suan化胰島su受體β抗體  0.1ml

Calpain 1 鈣蛋白mei(多肽)Multi-class aibodies： 0.5mg
人偏肺病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒乙suan（標(biāo)準(zhǔn)品）氟尼辛葡 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：100mg組織甘肽S轉(zhuǎn)移mei（GSH ST）總活性mei動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒

36%乙suan（標(biāo)準(zhǔn)品）伏草隆 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：2164-17-2 250mg血液甘肽S轉(zhuǎn)移mei（GSH ST）總活mei動(dòng)力性比色法定量檢測(cè)試劑盒

乙suan（HPLC,≥99.9%）FLUOROIMIDE 41205-21-4 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：10ng/ul 10ml微粒體甘肽S轉(zhuǎn)移mei（GSH ST）活性mei動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒

Amberlite® IRP-69陽(yáng)離子交換樹(shù)脂喹唑菌tong 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：136426-54-5 100mg胞漿甘肽S轉(zhuǎn)移mei（GSH ST）活性mei動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒

苊烯（標(biāo)準(zhǔn)品） 氟草煙 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：69377-81-7 100mg 甘肽-S-轉(zhuǎn)移mei（GSH-ST）活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒

二乙烯基苯與乙烯基苯磺suan鈉的聚合物氟哇唑 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：85509-19-9 100mg甘肽過(guò)氧化物mei（GSH PX）活性mei動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒

二苯胍（標(biāo)準(zhǔn)品）氟硫滅 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：106917-52-6 100mg血液甘肽過(guò)氧化物mei（GSH PX）活性mei動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒

13-乙?；?9-羥基巴丁III（標(biāo)準(zhǔn)品） 氟噻乙草酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：117337-19-6 100mg組織甘肽過(guò)氧化物mei（GSH PX）活性mei動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒