商品屬性:
貨號(hào)
規(guī)格
產(chǎn)品名稱
A-PJ1015-200Tx25μl
200Tx25μl
HotStart Bst 4.2 SYBR Green Mix(可凍干)
儲(chǔ)存條件:
HotStart Bst 4.2 SYBR Green Mix(可凍干)長(zhǎng)期保存請(qǐng)置于-20℃以下(12 個(gè)月有效);制品反復(fù)凍融10 次不影響性能,但應(yīng)避免反復(fù)凍融;制品由于含有高濃度的糖組分,-20℃保存的制品,在融化時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶物。此時(shí) 2.5xBst4.2Mix 可在 37℃進(jìn)行徹底融化,而 Bst4.2 酶制品在 30℃的溫度下融化,過高的溫度可能會(huì)導(dǎo)致熱啟動(dòng)性能下降。一經(jīng)融化推薦置于2-8℃保存,在此條件下制品穩(wěn)定儲(chǔ)存 6 個(gè)月。
產(chǎn)品介紹:
本品為 LAMP 熒光檢測(cè)專用的試劑,2.5xBst4.2SYBR Green Mix 包含了 Helicaser、dNTP、Mg2+、SYBRGreen 染料、反應(yīng)緩沖鹽、凍干賦形劑和穩(wěn)定劑。HotStartBst4.2 DNA/RNA 聚合酶為單獨(dú)的組分。本品不僅可作為常規(guī)檢測(cè)試劑,對(duì)于具有凍干經(jīng)驗(yàn)的研究者,本品還直接進(jìn)行后續(xù)凍干,無需再加入任何其它輔料。 Bst4.2 具有以下性能: (1)Bst 4.2 全系包含熱啟動(dòng)Aptamer,該配體確保酶在<30℃時(shí),酶活封閉效率>95%,在>60℃時(shí) 1min 內(nèi)完全釋放酶活。該特性利于室溫建立反應(yīng)體系,并大幅降低了低溫條件下的非特異擴(kuò)增; (2)反應(yīng)溫度提升到 70℃,大幅降低引物 Dimer 的形成,提高擴(kuò)增特異性,并使得粗樣品核酸釋放更加充分; (3)全系包含 Helicaser,因此,允許在不使用 F3/B3 引物的情況下進(jìn)行 LAMP 擴(kuò)增(easy LAMP),并允許 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。這將進(jìn)一步降低非特異擴(kuò)增,并使得擴(kuò)增均一性大幅提升。
特殊說明:
(1) Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 擴(kuò)增時(shí)的推薦反應(yīng)溫度為 65-70℃,*佳反應(yīng)溫度為 70℃。因此其可完全替代 的 Bst4.0 系列,用于標(biāo)準(zhǔn) LAMP 的擴(kuò)增。 (2) 由于 Helicaser 的反應(yīng)溫度為 70℃,因此在進(jìn)行 eLAMP 擴(kuò)增時(shí),反應(yīng)溫度為 70℃。 (3) 制品中包含高濃度的鹽組分,使用時(shí)做好個(gè)人防護(hù),防止制品與皮膚、眼、鼻、呼吸道等接觸和吸入,一旦接觸或吸入,請(qǐng)用大量的清水沖洗。 (4)防止氣溶膠污染,盡可能進(jìn)行分區(qū)操作。 1. 標(biāo)準(zhǔn) LAMP 和 eLAMP 擴(kuò)增的區(qū)別本試劑既可以用于標(biāo)準(zhǔn) LAMP 擴(kuò)增,也可以用于 eLAMP擴(kuò)增。 1.1 10x 標(biāo)準(zhǔn) LAMP Primer MixFIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each 1.2 10xeLAMP Primer Mix FIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each 注意:eLAMP(easy LAMP)為去除 F3/B3 引物的方法,為 Bst4.2系列專用的使用策略,對(duì)于大多數(shù)引物???,在 Helicaser 的加持下,擴(kuò)增速度幾乎不受影響。如引物擴(kuò)增效率低,可提高 FIP/BIP 濃度到 12~16uM。 1.3 擴(kuò)增溫度不同標(biāo)準(zhǔn) LAMP 擴(kuò)增 eLAMP 擴(kuò)增65-70°C 均可 70°C 反應(yīng) 2. 配制 LAMP 反應(yīng)體系2.5xBst4.2 SYBR Green Mix 10 μl 10x Primer Mix 2.5 μlHotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl 模板 DNA/RNA X μl ddH2O 到總體積 25 μl反應(yīng)體系配好后,置于 65-70°C 反應(yīng) 20~30min,1min 收集一次熒光信號(hào)。讀取擴(kuò)增曲線進(jìn)行陰性和陽性判讀。 3. 試劑的凍干反應(yīng)(**專業(yè)人員) 本試劑可供具有凍干經(jīng)驗(yàn)的人員直接進(jìn)行后續(xù)凍干,試劑的配方對(duì)凍干條件不苛刻。但對(duì)于不同的用戶來講,由于凍干形式、凍干體積、上機(jī)量、凍干容器、凍干磨具等因素存在差異,以下程序僅供參考。進(jìn)一步的程序優(yōu)化均需根據(jù)具體情況自行調(diào)整。對(duì)于非專業(yè)人員來講,請(qǐng)直接采購 的凍干制品,或委托訂制。 2.5xBst4.2 SYBR Green Mix 10 μl 25xPrimer Mix 1 μl HotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl Total 12 μl
制品成型后的凍干程序:
-50℃預(yù)凍 10min; -50℃ 4-8h(真空段);-50℃升溫到 25℃(每小時(shí)升溫 5℃);25℃ 2h; 25℃恒溫。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Elite Fect-I小核酸活體組織轉(zhuǎn)染試劑(小鼠轉(zhuǎn)染(20g/只))
都柏林沙門氏菌PCR試劑盒
磁珠法組織核酸提取試劑盒(手自通用)
谷芽染料法PCR鑒定試劑盒
pUC57EVL Seamless 試劑盒
人黏附分子E-cad基因PCR檢測(cè)試劑盒
PM原代細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑
豬鞭蟲PCR檢測(cè)試劑盒
寵物糞便核酸采集器(套裝)
雷氏普羅威登斯菌PCR試劑盒
Xerox DNA polymerase(2.5u/ul) 長(zhǎng)片段高保真聚合酶
人鼻病毒1B PCR試劑盒
Tth UvrD
人鼻病毒29PCR試劑盒
TRzol LS(液體樣本 RNA 提取試劑)
類圓線蟲通用PCR試劑盒
Taq FS DNA Polymerase(5U/ul)
T7 gp4B protein
犬支原體PCR試劑盒
T4 GP59 Loader protein
溶血性鏈球菌A群PCR檢測(cè)試劑盒
Super ECL Substrate
復(fù)制蛋白AELISA試劑盒
RTS BL21(DE3)Chaprone助溶表達(dá)感受態(tài)
苯諾龍/苯去酮ELISA試劑盒
Rnase A(20mg/ml)
HotStart Bst 4.2 SYBR Green Mix(可凍干)膠原蛋白ⅡELISA試劑盒
RAPA3G動(dòng)物組織直擴(kuò)PCR試劑盒
表達(dá)于SiSo細(xì)胞系的受體結(jié)合型腫瘤抗原ELISA試劑盒