原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞
商品屬性:
組織來源
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肝臟組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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人原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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上皮細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也**消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞是指具有肝功能的單位,是肝臟的基本組成單位之一。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞與主要病生理變化:急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞屬于中高度分化細(xì)胞,生長(zhǎng)營養(yǎng)需求高,在體外存活時(shí)間短;細(xì)胞呈圓形或多角形,核大而圓,居中,常染色質(zhì)豐富,部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官,在整個(gè)物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
DHEAELISAKit
大鼠彈力蛋白酶elisa分析檢測(cè)試劑盒
Rat Elastase ELISA
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山羊M型肌酸激酶(CKM)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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比色法
TEM電鏡冰凍切片組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB間接檢測(cè)試劑盒
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fever)抗體(IgM)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
組織EPHA3激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
肌球蛋白IG抗體
Myosin 1G
3號(hào)染色體開放閱讀框31抗體
C3ORF31
味覺2型受體蛋白家族49抗體 Anti-TAS2R49
維生素K依賴的蛋白C輕鏈抗體 Anti-protein C light chain
神經(jīng)腫瘤Nova2抗原抗體 Anti-Nova2
8-羥基脫氧鳥苷抗體 Anti-8-OHdG/8 Hydroxyguanosine
PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗水IgG H&L
人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞KIAA1211蛋白抗體
KIAA1211
ASTE1蛋白抗體
ASTE1
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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