原代細胞的培養(yǎng):
(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng),是建立細胞系的步,是一項基本技術(shù)。
原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
人破骨細胞
商品屬性:
組織來源
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骨髓
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細胞分類
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人原代細胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態(tài)
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多核巨細胞
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細胞簡介:
人破骨細胞分離自骨組織和骨髓;破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞,位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng),其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機制。但破骨細胞是一種終末分化細胞,屬于不增殖細胞群,不能增殖和傳代,只能進行原代培養(yǎng)且存活時間較短。
方法簡介:
公司實驗室分離的人破骨細胞采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導(dǎo)法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人破骨細胞經(jīng)TRAP染色檢測,純度可達30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 多核巨細胞
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠胱天蛋白酶10(CASP-10)elisa分析檢測試劑盒
豚鼠球蛋白A(IgA)elisa分析檢測試劑盒
通用型宋內(nèi)志賀菌Shigella sonnei 基因檢測試劑盒
活體組織線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒
大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)elisa檢測試劑盒
人變腎上腺素(MN)elisa分析檢測試劑盒
白三烯C4(LTC4)高效液相色譜法定量檢測試劑盒
小鼠胰脂肪酶(PL)elisa檢測試劑盒
大鼠流行性出血熱IgG抗體elisa檢測試劑盒
FAM73A蛋白抗體 FAM73A
FITC標記人CD13單克隆抗體 human CD13/FITC
磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 phospho-CDK5 (Tyr15)
流感病毒H3N7血凝素抗體 H3N7 hemagglutinin
蛋白激酶C抗體 PKA
C alpha + beta
登革熱病毒2糖蛋白NS1抗體 DENV-2 NS1
鋅指蛋白84抗體 ZNF84
性結(jié)合球蛋白抗體 SHBG
PRKR相互作用蛋白1抗體 PRKRIP1
ras癌基因家族Rab3b單克隆抗體 RAB3B
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶2抗體 NRK2/NEK4
絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶3抗體 MAPKAP3
肌球蛋白9B抗體 MYO9B
激活素受體2B抗體 Activin Receptor Type IIB
12號染色體開放閱讀框52抗體 RITA
20號染色體開放閱讀框134抗體 C20orf134
大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶1(ECE1)elisa檢測試劑盒
人破骨細胞大鼠25羥基維生素D3(25 HVD3)elisa分析檢測試劑盒
25 HVD3 ELISA Kit
人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)elisa分析檢測試劑盒
CALDELISAKit
原代細胞的分離方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
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