原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
人輸尿管平滑肌細(xì)胞
商品屬性：
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組織來(lái)源
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尿道
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類(lèi)
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人原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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長(zhǎng)梭形
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細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人輸尿管平滑肌細(xì)胞分離自輸尿管組織；輸尿管上接腎盂，下連膀胱，是一對(duì)細(xì)長(zhǎng)的管道，呈扁圓柱狀，位于腹膜后，為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu)，沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進(jìn)入骨盆。輸尿管有三個(gè)狹窄部：一個(gè)在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處)；一個(gè)在越過(guò)小骨盆入口處；后一個(gè)在進(jìn)入膀胱壁的內(nèi)部。這些狹窄是結(jié)石、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu)，即瓦耳代爾鞘，它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段，也可稱(chēng)為腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動(dòng)脈處；盆段，自髂動(dòng)脈到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜、輸尿管開(kāi)口。輸尿管管壁分為4層，黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮，約有4-5層細(xì)胞；固有層由細(xì)密的結(jié)締組織構(gòu)成，內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維；輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成；外膜為疏松結(jié)締組織，營(yíng)養(yǎng)血管由外膜進(jìn)入輸尿管。輸尿管有較厚的平滑肌層，可作節(jié)律性的蠕動(dòng)，使尿液不斷的流入膀胱。因此對(duì)輸尿管平滑肌運(yùn)動(dòng)的研究，是尿動(dòng)力學(xué)的重要研究方向。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的人輸尿管平滑肌細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的人輸尿管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：長(zhǎng)梭形
傳代特性：可傳3-5代左右，3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人輸尿管平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠蛋白激酶Cε(PKCε)elisa檢測(cè)試劑盒
核蛋白相互作用蛋白2抗體
KPNA2
細(xì)胞內(nèi)氯離子通道蛋白4抗體
CLIC4
大鼠胰島素原(PI)elisa檢測(cè)試劑盒
冰凍切片組織CASPASE-6蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
小鼠T細(xì)胞白血病源盒蛋白1(Tlx1/Hox11/Tlx-1)elisa檢測(cè)試劑盒
乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒
腦啡肽酶γ抗體
Neprilysin-like
Protease gamma
細(xì)胞質(zhì)PSD95相互作用因子抗體
GDA/GDC
轉(zhuǎn)錄因子CP2抗體 Anti-TFCP2C
胰脂肪酶抗體 Anti-Pancreatic Lipase
骨硬化病相關(guān)跨膜蛋白1抗體 Anti-OSTM1
減數(shù)分裂重組蛋白SPO11抗體 Anti-SPO11
磷酸化原癌基因RAF1抗體
phospho-RAF1
(Ser338)
味覺(jué)受體蛋白家族10亞基5抗體
OR10A5
血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體 Anti-VCAM-1
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體 Anti-Neurturin
軸突導(dǎo)向受體蛋白3抗體 Anti-Robo3
磷酸化轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子SP1抗體 Anti-phospho-TSFP1/SP1(Thr453)
大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人輸尿管平滑肌細(xì)胞人蛋白聚糖4(PRG4)elisa檢測(cè)試劑盒
PGE1
小鼠胰高血糖素樣肽1受體(GLP1R)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)elisa檢測(cè)試劑盒
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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