原代細胞的培養(yǎng)：
(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的步，是一項基本技術(shù)。
原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
人心肌成纖維細胞
商品屬性：
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組織來源
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心臟組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細胞分類
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人原代細胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態(tài)
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成纖維細胞樣
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細胞簡介：
人心肌成纖維細胞分離自心臟組織；心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成，非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%，其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來，人們逐漸了解到非心肌細胞不僅對心肌細胞具有結(jié)構(gòu)上的支持、保護作用，而且還具有自分泌和旁分泌功能，影響心肌細胞的結(jié)構(gòu)和生理功能；心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負責細胞基質(zhì)外的合成，當心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結(jié)締組織中常見的細胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質(zhì)，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細胞，其功能活動也得以恢復(fù)，參與組織損傷后的修復(fù)。因此，對心肌成纖維細胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點。
方法簡介：
公司實驗室分離的人心肌成纖維細胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人心肌成纖維細胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠促卵泡素(FSH)elisa檢測試劑盒
Menin抑癌蛋白抗體
Menin
DNAJC22蛋白抗體
DNAJC22
水土中亞硝酸鹽含量測試盒
冰凍切片組織TNF BETA蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa檢測試劑盒
D-二聚體D-Dimer試劑盒 R1：18ml×1 R2：6ml×1 膠乳增強
磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯酶抗體
PGLS
源盒蛋白C6抗體
HOXC6
前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白 Anti-TPD52/Prostate and colon associated
protein
抑癌蛋白DLP1 Anti-PDSS2
脯氨酸脫氫酶抗體 Anti-PRODH
導(dǎo)向蛋白3B抗體 Anti-Semaphorin 3B
堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗小鼠k鏈
Rabbit Anti-Mouse
Kappa light chain / AP
磷酸化紅細胞膜條帶4.1蛋白抗體
phospho-EPB41
(Tyr418 + Tyr660)
鋅指蛋白370抗體 Anti-ZDHHC7/ZNF370
磷酸化IKB alpha抗體 Anti-phospho-NFKBIA(Tyr305)
復(fù)制因子A蛋白2 Anti-RPA32/RPA2
發(fā)育多能性相關(guān)蛋白3抗體 Anti-Stella/DPPA3
大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)elisa分析檢測試劑盒
人心肌成纖維細胞即用型TB培養(yǎng)基 5個/包
Borrelia
burgdorferi RFLP基因分析試劑盒
小鼠成纖維細胞生長因子10(FGF10)elisa分析檢測試劑盒
大鼠CD63分子(CD63)elisa檢測試劑盒
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
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