原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
人椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞
商品屬性：
|
組織來(lái)源
|
椎間盤組織
|
規(guī)格
|
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
|
|
細(xì)胞分類
|
人原代細(xì)胞
|
培養(yǎng)條件
|
氣相：空氣，95%；CO2，5%
|
|
生長(zhǎng)特性
|
貼壁
|
細(xì)胞形態(tài)
|
梭形、多角形
|
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞分離自椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個(gè)密封體。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚，而后側(cè)較薄。纖維環(huán)的前部有強(qiáng)大的前縱韌帶，后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細(xì)胞密度為9000個(gè)細(xì)胞/mm3，其外層的細(xì)胞呈梭型，主要屬于纖維細(xì)胞，內(nèi)層細(xì)胞呈圓形，主要屬于軟骨細(xì)胞。在培養(yǎng)的情況下，用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn)，它們的核較圓，核仁較明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體多，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜，由單位膜包繞初級(jí)深酶體和次級(jí)深酶體。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復(fù)合體和分泌顆粒，纖維環(huán)細(xì)胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛，保證纖維環(huán)生理代謝活動(dòng)所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少，纖維環(huán)的生物性能就會(huì)減弱，椎間盤開始退變。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產(chǎn)品：
BMP-9ELISAKit
倉(cāng)鼠前列腺素E2(PGE2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
PGE2 ELISA Kit
人毒蕈堿型乙酰膽堿受體M2(mAChRM2)自身抗體elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanmuscarinicacetylcholinereceptorM2(mAChRM2)autoantibodyELISAkit
小鼠白介素27(IL27)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)elisa檢測(cè)試劑盒
鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
犬I 型膠原蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
INTS1蛋白抗體
INTS1
炭疽桿菌致死因子LF抗體
Anthrax lethal
factor
（AMYLASE）定性檢測(cè)試劑盒
兔γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(GGT1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠尿調(diào)蛋白(UMOD)elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)（DNA合成抑制）試劑盒
多通道膜蛋白PTCHD2抗體
PTCHD2
癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子16抗體
CEACAM16
泛素蛋白連接酶2N抗體 Anti-Ube2N/UBC13
原鈣粘蛋白γB1抗體 Anti-PCDHGB1
細(xì)胞膜調(diào)控蛋白Paralemmin 1抗體 Anti-Paralemmin 1
粘結(jié)蛋白SA1抗體 Anti-SA1/Nuclear protein stromal antigen 1
堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的羊抗雞IgG H&L
人椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP3)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)elisa檢測(cè)試劑盒
人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
組織EPHB4激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
- 溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
- 免責(zé)申明：以上內(nèi)容為注冊(cè)會(huì)???自行發(fā)布，若信息的真實(shí)性、合法性存在爭(zhēng)議，平臺(tái)將會(huì)監(jiān)督協(xié)助處理，歡迎舉報(bào)