原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性：
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組織來(lái)源
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肝臟組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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大鼠原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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???相：空氣，95%；CO2，5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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內(nèi)皮細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也**消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（SEC）是肝臟內(nèi)所占比例的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞，位于肝竇腔與肝細(xì)胞之間，具有物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、吞噬、抗原提呈、耐受等功能。SEC由于擁有一般細(xì)胞所沒(méi)有的窗孔結(jié)構(gòu)、細(xì)胞間連結(jié)松散、內(nèi)皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，從而達(dá)到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時(shí)，肝竇內(nèi)皮細(xì)胞窗孔逐漸減少或消失，內(nèi)皮下基膜形成，產(chǎn)生類似于連續(xù)型的結(jié)構(gòu)，這一過(guò)程稱為肝竇化。它由多種因素引起，其過(guò)程極復(fù)雜，在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現(xiàn)，近年來(lái)受到廣泛關(guān)注。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心、密度梯度離心法，并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31、CD14熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產(chǎn)品：
人多巴胺D1受體(D1R)elisa檢測(cè)試劑盒
即用型LB液體培養(yǎng)基Kan+
60VIA
脂蛋白脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠肺表面活性蛋白D(SP-D)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠α1抗胰蛋白酶前體(pre-α1-AT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
二級(jí)目錄：大鼠elisa檢測(cè)試劑盒
6倍丙三醇DNA電泳上樣緩沖液
小鼠胞外超氧化物歧化酶[Cu-Zn](SOD3)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)elisa檢測(cè)試劑盒
eIF2Bγ蛋白抗體 EIF2B3
FAM126B蛋白抗體 FAM126B
磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK1抗體 phospho-MARK1 (Thr215)
磷酸化血管**素受體2抗體 Phospho-Tie2 (Tyr992)
穿膜蛋白DLK1抗體（C端） DLK1
單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)14抗體 MCT14
鋅指蛋白292抗體 ZNF292
鋅指蛋白785抗體 ZNF785
PerCP-Cy5.5標(biāo)記人CD117 (c-kit)單克隆抗體 human
CD117 (c-kit)/PerCP-Cy5.5
PE標(biāo)記人TDT單克隆抗體 human TDT/PE
生長(zhǎng)分化因子9抗體 GDF9
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶（N端）抗體 ADAR1
環(huán)指蛋白109抗體 RNF109/TRIM56
肌醇單磷酸酶1抗體 IMPA1
自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體 TYROBP
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框190抗體 C1ORF190
Rac2鳥(niǎo)苷酸酶活性分析試劑盒
大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞小尾寒羊增食欲素(orexin)elisa分析檢測(cè)試劑盒
Small Tailed Han
sheep orexin ELISA Kit
人白介素2誘導(dǎo)的T細(xì)胞激酶(ITK)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanITKELISAkit
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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