(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
組織來源
鞏膜組織
規(guī)格
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞分類
大鼠原代細胞
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
細胞簡介:
大鼠鞏膜成纖維細胞分離自鞏膜組織,鞏膜是眼球壁的主要組成之一。是眼球纖維膜的后5/6部分。前方聯(lián)接角膜,后方與視神經的鞘膜延續(xù)。鞏膜在視神經穿出部附近厚,愈前愈薄,在肌腱附著處又復增厚。其與角膜交界處,外面有環(huán)形的角膜溝,深部有鞏膜靜脈竇。小兒的鞏膜為淺藍色,成年為白色,老年因脂肪沉著而帶黃色。鞏膜結構堅韌,有支持和保護眼內組織的作用。成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠鞏膜成纖維細胞采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠鞏膜成纖維細胞經Vimentin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 貼壁不包被
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠谷光甘肽合成酶(GSS)elisa檢測試劑盒
蛛受體3抗體
LPHN3
細胞質FMR1相關蛋白抗體
CYFIP1
小鼠4-羥基壬烯酸(HNE)elisa檢測試劑盒
APC蛋白標記試劑盒
全組織馮庫薩(VON KOSSA)鈣染色試劑盒
雞HSP60抗體(IgG)elisa檢測試劑盒
核孔蛋白樣蛋白2抗體
NUPL2
血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體
HBZ
端粒結合蛋白2抗體 Anti-TRF2
蛋白激酶C beta 1/2抗體 Anti-PKC beta 1/2
磷酸化酶激酶γ2 Anti-PHKG2
信號誘導增殖相關蛋白1樣蛋白2抗體 Anti-SIPA1L2
磷酸化活化復制因子2抗體
phospho-ATF2 (Ser480)
嗅覺受體5M11抗體
OR5M11
鋅指蛋白BED5抗體 Anti-ZBED5
神經毒性因子ICP34.5(人單純皰疹Ⅰ型)抗體 Anti-HSV 1
鋅指蛋白754抗體 Anti-Rex1/Zinc finger protein 754
神經突觸相關蛋白SLITRK6抗體 Anti-SLITRK6
大鼠Smad1 elisa分析檢測試劑盒
大鼠鞏膜成纖維細胞大鼠白介素2可溶性受體β鏈(sIL-2Rβ)elisa分析檢測試劑盒
sIL-2Rβ ELISA kit
人肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)elisa分析檢測試劑盒
HumandystrophinELISAKit
原代細胞的分離方法:
一、懸浮細胞的分離方法