組織來源 |
主動脈組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細胞分類 |
大鼠原代細胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
成纖維細胞樣 |
細胞簡介:
大鼠主動脈外膜成纖維細胞分離自主動脈血管外膜組織;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細胞以成纖維細胞為主,當(dāng)血管受損傷時,成纖維細胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明???細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一,其主要生理功能合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠主動脈外膜成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠主動脈外膜成纖維細胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng),是建立細胞系的步,是一項基本技術(shù)。原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
原代細胞的分離方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Mousemitogen-activatedproteinkinase1ELISAkit
大鼠成纖維細胞生長因子23(FGF-23)elisa分析檢測試劑盒
FGF23 ELISA Kit
人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)elisa分析檢測試劑盒
HumanTBGELISAKit
磷酸化鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug+SNAIL抗體 Anti-phospho-SNAIL + SLUG(Ser246)
RMND5B蛋白抗體 Anti-RMND5B
嘌呤霉素敏感性氨肽酶蛋白抗體 Anti-NPEPPS/PSAP
磷酸化DNA結(jié)合蛋白B抗體 Anti-Phospho-YB1(Ser102)
植物花生四烯酸(AA)elisa分析檢測試劑盒
AA ELISA kit
人促甲狀腺素受體(TSHR)抗體elisa分析檢測試劑盒
HumanTSHRantibodyELISAKit
谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)測試盒
間接檢測試劑盒(含AP二抗)
小鼠單氨氧化酶A(MAOA)elisa檢測試劑盒
大鼠FMS樣激酶3配體(Flt3L)elisa分析檢測試劑盒
NBPF16蛋白抗體
NBPF16
5號染色體開放閱讀框35抗體
C5orf35
四分子交聯(lián)體5抗體(四旋蛋白) Anti-TSPAN5
磷酸化嗜中性粒細胞胞漿因子4抗體 Anti-Phospho-p40phox (Thr154)
氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體 Anti-OXSR1/OSR1
SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 Anti-SHC
Cy5.5標(biāo)記的兔抗牛IgM
大鼠主動脈外膜成纖維細胞L型氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白3抗體
LAT3
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8抗體
COPS8
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