原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
小鼠骨髓單核細(xì)胞
商品屬性:
組織來源
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骨髓
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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小鼠原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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巨噬細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡介:
小鼠骨髓單核細(xì)胞分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能**紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括、病毒等;某些細(xì)胞能**抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細(xì)胞是一種未成熟的單核細(xì)胞,在骨髓細(xì)胞中約占0.04%,被認(rèn)為是破骨細(xì)胞的前體細(xì)胞,較外周血單個(gè)核細(xì)胞誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細(xì)胞數(shù)量多,純度高,較脾細(xì)胞誘導(dǎo)法分化效率高。骨髓單核細(xì)胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細(xì)胞,它屬干細(xì)胞類型。目前,大多數(shù)研究用細(xì)胞分離液分離提取骨髓單核細(xì)胞,近也有采用磁珠分離法分離骨髓單核細(xì)胞。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓單核細(xì)胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓單核細(xì)胞經(jīng)CD68熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)elisa檢測試劑盒
大鼠成纖維細(xì)胞生長因子11(FGF11)elisa檢測試劑盒
組織氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性比色法定量檢測試劑盒
人白三烯B4(LTB4)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
小鼠神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)elisa檢測試劑盒
大鼠肌球蛋白重鏈1(MYH1)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞PRAK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
人肌細(xì)胞**素(MYOG)elisa分析檢測試劑盒
中心體蛋白1+2抗體 Centrin-1+Centrin-2
腫瘤抑制基因p53抗體 p53 (FL-393)
干擾素α抗體 IFNA13
谷氨酸受體1抗體 NMDAR1
KPNA6蛋白抗體 KPNA6
MAPK調(diào)控蛋白TRB2抗體 TRIB2
熱休克蛋白105抗體 HSP105
絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體 GCM2
BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 SLX4/BTBD12
CD3抗體 CD3
利鈉肽受體A抗體 Natriuretic Peptide Receptor A
磷酸化C端結(jié)合蛋白1抗體 phospho-CTBP1 (Ser422)
γ-谷氨酰羧化酶抗體 GGCX
白介素1β/IL-1β重組兔單克隆抗體 IL-1 beta
細(xì)胞色素P450 2B6抗體 Cytochrome P450 2B6
纖維鞘相互作用蛋白2抗體 FSIP2
犬CD4分子(CD4)elisa檢測試劑盒
小鼠骨髓單核細(xì)胞人白介素17A(IL-17A)elisa檢測試劑盒
血液尿激酶(UROKINASE)活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)elisa檢測試劑盒
大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa檢測試劑盒
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
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