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細(xì)胞簡介:
肌腱細(xì)胞是肌腱組織的基本功能單位,主要合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和糖蛋白基質(zhì),維持肌腱組織的新陳代謝。
肌腱損傷后的方式包括內(nèi)源性和外源性,而理想的方式是控制外源性,促進(jìn)內(nèi)源性。內(nèi)源性的機(jī)制是肌腱細(xì)胞通過細(xì)胞自身的增殖從而促進(jìn)肌腱,但目前肌腱細(xì)胞在體外經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)后會喪失分裂增殖能力。
目前已知多種因素影響肌腱過程,其中與肌腱關(guān)系密切的有著重要調(diào)控作用的細(xì)胞因子主要有:堿性成纖維生長因子,轉(zhuǎn)化生長因子
β,骨形態(tài)發(fā)生蛋白-12,血管內(nèi)皮生長因子,胰島素樣生長因子-1,血小板源性生長因子等。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
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大鼠肌腱細(xì)胞
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種屬
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大鼠
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組織來源
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肌腱組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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貨號
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A01X1677
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細(xì)胞形態(tài)
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梭形細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長特性
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貼壁培養(yǎng)
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細(xì)胞特性:
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的肌腱組織。
2) 細(xì)胞鑒定:Ⅰ型膠原熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 Delf 原代肌腱 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
① 靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性
b 細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮。
g 待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
② 懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞
b 短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行
c 細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn)。
d 長期培養(yǎng)時,細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長。
f 細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
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