人小腸成纖維細(xì)胞
商品屬性:
組織來源
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小腸組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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人原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長特性
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貼壁培養(yǎng)
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細(xì)胞形態(tài)
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成纖維樣細(xì)胞
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細(xì)胞簡介:
小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。一般根據(jù)形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化將小腸分為三段,分別為十二指腸,空腸和回腸。小腸壁結(jié)構(gòu)一般分 4層,由外向內(nèi)依次為:漿膜層,平滑肌層,粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層:靠近粘膜下層的是一層平滑肌,稱為粘膜肌層。其次為結(jié)締組織,又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)成的粘膜。
成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織中常見的細(xì)胞,電鏡下,成纖維細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和高爾基復(fù)合體,表明其具有合成和分泌蛋白質(zhì)的功能。己知成纖維
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于手術(shù)切除的正常小腸組織。
2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:成纖維樣細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 Delf原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗、細(xì)胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
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磷酸化蛋白磷酸酶2抗體 Anti-Phospho-PTPN11/SHP2 (Tyr477)
蛋白Z抗體 Anti-Protein Z
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羅丹明標(biāo)記豚鼠IgM
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