原代細胞的培養(yǎng)：
(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的步，是一項基本技術(shù)。
原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
小鼠腦血管周細胞
商品屬性：
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組織來源
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腦組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細胞分類
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小鼠原代細胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁培養(yǎng)
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細胞形態(tài)
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長梭形細胞
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細胞簡介：
腦血管周細胞分布于腦組織的微血管系統(tǒng)中，調(diào)節(jié)血管形成、穩(wěn)定和功能的關(guān)鍵因素。周細胞典型的特征是有一個突出的核，核周圍胞漿較少，有許多平行于微血管長軸的突起，這些突起逐漸變細并包繞微血管腔，起到對管腔的支持作用。
同時，一個周細胞可以通過伸展的突起與微循環(huán)中的多個接觸。此外，周細胞和內(nèi)皮細胞間的相互作用在血管新生中具有極為重要的作用。
細胞特性：
1）組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2)細胞鑒定：平滑肌肌動蛋白（α-SMA）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
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LRRC41蛋白抗體 LRRC41
脂肪細胞分化因子24抗體 FAD24/NOC3L
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白5抗體 TNFAIP5
肝癌衍生生長因子2抗體 HRP2
高密度脂蛋白抗體 High density lipoprotein
細胞周期蛋白3抗體 DNAJA2
線粒體核糖體蛋白L34抗體 MRPL34
β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體 beta Amyloid 1-16
艾滋病病毒EP3抗體 HIVEP3
BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體 BAG5
CD14重組兔單克隆抗體 CD14
蛋白磷酸酶非受體型12抗體 PTPN12
磷酸化補體成分5受體1抗體 phospho-C5R1 (Ser338)
抗淬滅劑Ⅱ（熒光增強、持久發(fā)光）
小鼠腦血管周細胞分泌性磷蛋白24抗體 Anti-SPP24/SPP2
FITC標(biāo)記的小鼠抗兔IgG H&L
Mouse Anti-Rabbit
IgG H&L / FITC
范可尼貧血相關(guān)蛋白M抗體
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
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