標(biāo)記物的制備
在酶免yi技術(shù)中制備標(biāo)記物的抗原應(yīng)純度高、抗原性完整;制備標(biāo)記物的抗體應(yīng)特異性好、效價高、親和力強、比活性高、能批量生產(chǎn)和易于分離純化。
制備酶標(biāo)記物的方法應(yīng)符合簡單、產(chǎn)量高;避免酶、抗體(抗原)、酶標(biāo)記物各自形成聚合物;標(biāo)記反應(yīng)不影響酶的活性和抗原抗體的免yi 反應(yīng)性等原則。標(biāo)記物制備的方法基本屬于兩類:
一、交聯(lián)法
交聯(lián)法是以一可同時與酶和抗體(抗原)結(jié)合的 交聯(lián)劑作為“橋”,分別連接酶與抗體(抗原)的方法,此類方法中目前zui常用的是戊二醛交聯(lián)法,形成的結(jié)合物為:酶-戊二醛-抗體(抗原)
二、直接法
直接法是用一活化劑首先將酶活化,被活化的酶分子上的基團直接可與抗體(抗原)結(jié)合形成標(biāo)記物,如過酸鈉法。形成的結(jié)合物為:酶-抗體(抗原)。