產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號強(qiáng)
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產(chǎn)品名稱
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H7N9 禽流感病毒試劑盒熒光PCR法
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規(guī)格
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50T
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貨號
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XG-R63252
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儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM）
2μl
引物2（10PM）
2μl
Taq酶（2U/μl）
1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至
50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。
山羊皮膚細(xì)胞;WGS1 大鼠心肌細(xì)胞，H9c2細(xì)胞 Ca759細(xì)胞，615小鼠癌瘤株N'-Cbz-L-鳥氨酸質(zhì)量規(guī)格：0.98L-Orn(Z)-OH
人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2N-乙酰-L-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRN-Acetyl-L-phenylalanine
HA Others H1N2 甲型流感 H1N2
(A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-脯氨酰胺質(zhì)量規(guī)格：0.98L-Prolinamide
CL-0334EB-3(人Butt瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-谷氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%(TLC)，標(biāo)準(zhǔn)品L-Glutamic acid
IL1R2 Others Human 人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸(sigma)質(zhì)量規(guī)格：>99%,Sigma分裝L-Glutamic acid
CCL17 Others Human 人 CCL17 / TARC /
SCYA17 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 白頭翁皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品)Anemoside A3質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-4黃花敗醬甙C;牡丹草苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)Scabioside C質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
HeLa[Chang Liver]細(xì)胞，張氏肝細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,HRT-S1細(xì)胞 CM-R069大鼠腎成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL齊墩果酸-3-O-β-D葡萄糖( 1→3)-α-L-鼠李糖(1→2)-α-L-阿拉伯糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)V質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]Hederacolchiside A1(標(biāo)準(zhǔn)品)Hederacolchiside
A1質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 常春藤苷H;灰氈毛忍冬皂苷甲Kalopanaxsaponin
H質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞潮霉素B質(zhì)量規(guī)格：>90%,粉末,進(jìn)分Hygromycin B
人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE) 人膀胱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N2-異丁?；?span>-2'-
脫氧鳥苷