原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
產(chǎn)品名稱:禽流感病毒H10N8亞型試劑盒熒光PCR法
產(chǎn)品貨號:XG-R63258
規(guī)格:50T
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步。
應用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
人胰腺癌細胞;PANC-1甲咪唑煙酸(標準品)質量規(guī)格:分析標準品 Imazapic
KLK7 Others Human 人 KLK7 / PRSS6 人細胞裂解液 (陽性對照) 異標準溶液(10μg/ml,u=6%)質量規(guī)格:10μg/ml,u=6%Iprobenfos
standard solution
CM-H061人腎小球內皮細胞完全培養(yǎng)基100mL氘代鹽酸(5g )質量規(guī)格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O Deuterium Chloride
CD177 Others Human 人 CD177 / PRV-1 / PRV1 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代鹽酸(5g )質量規(guī)格:D, 99.5% DCL 35% IN D2ODeuterium Chloride
人內皮細胞HDLEC氘代鹽酸(10g)質量規(guī)格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O Deuterium Chloride
CD200 Others Mouse 小鼠 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-鹽酸奧昔布寧(S)-Oxybutynin 質量規(guī)格:美國進口
人肝內膽管上皮細胞裂解物HIBEpiCL奧司他韋酸Oseltamivir Acid質量規(guī)格:美國進口
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) 地布卡因Dibucaine質量規(guī)格:美國進口
人腦膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸地布卡因-d9Dibucaine-d9 質量規(guī)格:美國進口
MC53細胞,小鼠腎系膜細胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) 貓腎細胞;F81多利培南Doripenem質量規(guī)格:美國進口
Promocell C-28056 M2-Macrophage GenerationMedium
DXF, M2-巨噬細胞**培養(yǎng)基DXF 250ml雙嘧達莫二-O-β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格:美國進口Dipyridamole
Di-O-β-D-glucuronide
人主動脈平滑肌細胞cDNAHASMC cDNA雙嘧達莫-D20 (主要的)質量規(guī)格:美國進口Dipyridamole-D20
(Major)
IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙嘧達莫單-O-β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格:美國進口Dipyridamole
Mono-O-β-D-glucuronide
人皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL酮基他米巴羅汀質量規(guī)格:美國進口Keto Tamibarotene
C2C12細胞,鼠肌原細胞 H08910(卵巢癌細胞) 大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1ent-伏立康唑質量規(guī)格:美國進口ent-Voriconazole
心肌成纖維細胞Many types of
cells包裝:5 × 105方(1ml)Calciumoxalate乙二酸鈣25毫克CP,98%
Mo7e細胞,人巨細胞白血病細胞株 小鼠正常肝細胞,NCTC1469細胞 角臘上皮細胞生長添加物CEpiCGS頭孢炳1(E)-異構體 Cqfprozil
(q)-IsoMqr 9676-86-3
NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2Urokinase雅激酶5克BR,2-5u/ul,99%
BT-474(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M085小鼠表皮角化細胞完全培養(yǎng)基100mL 人Burkkit瘤細胞;DaudiSMBUFFERSM 緩沖液超級500MLRT
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+D 1mg/5mg/10mg Fluka 01815
PCR服務:
公司推出,該技術不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。
禽流感病毒H10N8亞型試劑盒熒光PCR法1、熒光定量PCR服務要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
(03)請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。
(03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。
(04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準:
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準。
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