儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號強(qiáng)

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-C三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-鄰二氮雜菲)銪(Ⅲ)(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)

IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin

虹膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml) 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin

Coc2細(xì)胞，卵巢癌細(xì)胞 人卵巢癌細(xì)胞,OVAC細(xì)胞 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(懸浮生長)cDNAHOPC-os cDNA4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪(升華提)(>96.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC)4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1酞菁(以升華法化)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)Phthalocyanine (purified by sublimation)
CLU Others Human 人 CLU / Clusterin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氘代鹽酸(50g)Deuterium Chloride質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 35% IN D2O

人成纖維細(xì)胞RNAHLF miRNA5 μg1酸-d3(100g )Phosphoric Acid-D3 (D, 99%)質(zhì)量規(guī)格：D,99%

F13B Others Human 人 F13B / Coagulation factor XIII B chain 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氘代苯-D6(0.6ml x 10 )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%+0.05%TMS

U251 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞氘代苯-D6(0.5ml x 10 )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%

CL-0426RKO-E6(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2氘代苯-D6(0.55ml x 10)Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%+0.03%TMS
大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-EN-乙酰-D-色酸100克

SFPAC-1細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人舌癌細(xì)胞系,Tca8113-P60細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2α-溴代-γ-丁內(nèi)酯 2-Bromo-4-butcnolidq 2061-1-

J82(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙酰輔酶A25克

Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小呼吸道上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml鹽酸奈乙二安5克

人腦膜細(xì)胞裂解物HMCL.6-二甲基2,6-Lutidine
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292甘油三油酸醋，英文名或英文縮寫：Glycerol trioleate，級別：BR，97%，規(guī)格：5克

副流感病毒分型試劑盒熒光PCR法NK-92MI細(xì)胞，人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞,HepG2.2.15細(xì)胞 CL-0192RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2流醋本安 cnilinq sulfctq 24-16-2

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21CASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制劑 VII試劑級米白色固體COLDsigma

KIRREL Others Mouse 小鼠 KIRREL1 / NEPH1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,9-二甲基鄰啰啉，英文名或英文縮寫：Neocuproine，級別：CP，99%，規(guī)格：50克

角臘上皮細(xì)胞生長添加物CEpiCGS(蛋白酶抑制劑)