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產品資料

人鼻病毒試劑盒熒光PCR法

人鼻病毒試劑盒熒光PCR法
  • 如果您對該產品感興趣的話,可以
  • 產品名稱:人鼻病毒試劑盒熒光PCR法
  • 產品型號:XG-R63302
  • 產品展商:西格
  • 產品文檔:無相關文檔
簡單介紹
人鼻病毒試劑盒熒光PCR法保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產品描述

產品特點: 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷
靈敏度高:可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高:有效避免非特異性擴增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高:復孔間差異小,實驗結果重復性強
擴增性能優(yōu):擴增效率高,熒光信號強

產品名稱

人鼻病毒試劑盒熒光PCR

規(guī)格

50T

貨號

XG-R63302

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內**的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾高壓。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
牛腎細胞;MDBK(BVDV-free)異水飛薊賓(分析標準品,98%)質量規(guī)格:分析標準品,98%Isosilybin

LCN2 Others Human LCN2 / NGAL 人細胞裂解液 (陽性對照) 3,3-二沒食子酸酯茶黃素(分析標準品,98.0%(HPLC))質量規(guī)格:分析標準品,98.0%(HPLC)Theaflavin 3,3-digallate

CM-H092人脈絡膜血管細胞完全培養(yǎng)基100mL對茴香醛乙醇溶液(含乙酸和硫酸)質量規(guī)格:用于薄層色譜顯色劑p-Anisaldehyde (contains Acetic Acid, H2SO4) Ethanol Solution

KIR2DL1 Others Human KIR2DL1 / CD158a 人細胞裂解液 (陽性對照) 二甲亞砜-d6 99.9原子%D(>99.0%(GC))質量規(guī)格:>99.0%(GC)Dimethyl Sulfoxide-d6 99.9atom%D

小鼠晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL重水 99.8原子%D質量規(guī)格:99.8原子%DDeuterium Oxide 99.8atom%D
CM-H096
人關節(jié)軟骨細胞完全培養(yǎng)基100mL透明質酸酶Hyaluronidase質量規(guī)格:≥500IU/mg,BR,牛源提取

PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1 小鼠結腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLN2-異丁酰-2'-脫氧鳥甙ibu-dG質量規(guī)格:>98%,BR

RN-s, 大鼠紋狀體神經元 RattusN-苯甲酰-2'-脫氧胞苷bz-dC質量規(guī)格:>98%,BR

EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) N6-苯甲酰-2'-脫氧腺苷bz-dA質量規(guī)格:>98%,BR

人癌細胞;MCF 7B5'-O-三苯甲基尿苷Trt-rU質量規(guī)格:>97%,BR
TNFRSF19 Others Mouse
小鼠 TNFRSF19 / OY 人細胞裂解液 (陽性對照) N-葡萄糖苷伐倫克林質量規(guī)格:美國進口Varenicline N-Glucoside

山羊皮膚細胞;WGS1伐倫克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格:美國進口Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide

CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 去乙酰基長春瑞濱質量規(guī)格:美國進口Deacetyl Vinorelbine

CL-0137NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維5×106cells/瓶×21酸長春瑞濱水合鹽質量規(guī)格:美國進口Vinorelbine ditartrate salt hydrate

HGC-27人胃癌細胞 細胞,HelaS3細胞 ES-2(卵巢透明細胞癌細胞)N-代丁二(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BRN-Iodosuccinimide
人腎系膜細胞 (HRMC)(1×106 ) 細胞名稱 種屬聚酸鈉100毫克保存:-20

大鼠肺細胞;WL1DL-酪酸 DL-Tyrosine,99% 556-03-6 25G 通用試劑

TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細胞裂解液 (陽性對照) 肉豆蔻醋異炳酯;十四醋異炳酯;十四醋1-基基酯 Isopropyl Myristctq;Isopropyl tqtrcdqccnoctq 110-7-0

KU812 人外周血嗜堿性白血病細胞亞1

MS751人頸表皮癌細胞 MS751 human cervical epidermoid carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS12232-99-4鉍酸鈉wo7ium BISMUTHATE
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
人鼻病毒試劑盒熒光PCR將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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