產(chǎn)品名稱：南非諾卡菌試劑盒熒光PCR法
產(chǎn)品貨號(hào)：XG-R63338
規(guī)格：50T
分類：熒光PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
檢測(cè)方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過(guò)量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào)，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針?lè)ǎ?br />
探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步。
應(yīng)用案例：
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀釋陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的長(zhǎng)為 86bp 的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。5.換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6.換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.換槍頭，在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 4 號(hào)管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20 μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待測(cè)樣品需要做三次重復(fù)，下表只列出一次。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后*后加）
PCR服務(wù)：
公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務(wù)要求：
（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。
（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等
2、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。
（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。
3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。
人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63(R)-(+)-非洛地平質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口(R)-(+)-Felodipine
GP120 Others HIV 人類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype
CRF07_BC) gp120 / SU 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (S)-(-)-非洛地平質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口(S)-(-)-Felodipine
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-248-羥基鳥嘌呤鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口8-hydroxy Guanine
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 煙酰胺鳥嘌呤二核苷酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nicotinamide
guanine dinucleotide salt
頜下腺上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)脫氫阿立哌唑鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Dehydro
Aripiprazole
EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 /
Ephrin-A4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1-氧米氮平(米氮平雜質(zhì)C)1-Oxo Mirtazapine (Mirtazapine Impurity C)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人表皮色素細(xì)胞-深色素cDNAHEM-d cDNAN-去甲基洛哌丁胺-d3N-Desmethyl
Loperamide-d3質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Ierferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (S)-酮咯酸(S)-Ketorolac質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)(R)-酮咯酸(R)-Ketorolac質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
Bel-7405細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細(xì)胞,PA317細(xì)胞 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21(S)-蘭索拉唑(S)-Lansoprazole質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人內(nèi)根鞘細(xì)胞HHIRSC碳化硅shēng huà shì jì容量：RT1克
RHOA Others Human 人 RhoA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) α-甘油1酸脫氫酶 α-Glycerophosphate
dehydrogenase 9075-65-4 200UN 通用試劑
家兔皮膚細(xì)胞;DR-S12-安基-5-酚-7-磺醋(又名J醋) J ccid 1987--2
L929細(xì)胞，成纖維細(xì)胞 人胰腺細(xì)胞,AR42J細(xì)胞 CM-R125大鼠牙細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL粉shēng huà shì jì容量：250毫克
南非諾卡菌試劑盒熒光PCR法大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3100-42-5本;本;蘇合香1;斯替林Styrene;Ethenylbenzene;Styrol;Vinyl
benzene;CinnaMene;Styrolene;CinnaMol
腹膜內(nèi)皮細(xì)胞Many types of
cells包裝：5 × 105方(1ml)Calciumpyrophosphate焦嶙酸鈣5克CP，98.5%
HCT-116細(xì)胞，低分化結(jié)腸腺癌細(xì)胞 人內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,HEC-1-A細(xì)胞 人肺成纖維細(xì)胞cDNAHPF cDNA十三烷酸 Tridecanoic acid,≥98% 638-53-9 1G 通用試劑
長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞;4647赫斯特?zé)晒馊玖?span lang="EN-US">33258 Hoqchst
33258;BisbqnziMidq H33258 3491-42-4