產品名稱:腸道病毒71型試劑盒熒光PCR法
產品貨號:XG-R63362
規(guī)格:50T
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環(huán)擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成完全同步。
應用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
PCR服務:
公司推出,該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
(03)請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。
(03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。
(04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準:
我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準。
人膀胱平滑肌細胞(HBdSMC)( 5×105 )3-甲氧基地氯雷他定質量規(guī)格:美國進口3-Methoxy Desloratadine
CL-0163MSTO-211H(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2異地氯雷他定質量規(guī)格:美國進口Iso Desloratadine
人肺支氣管癌細胞;NCI-H1650 大鼠嗅鞘細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-甲基地氯雷他定質量規(guī)格:美國進口N-Methyl
Desloratadine
raw264.7 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞5-羥基地氯雷他定質量規(guī)格:美國進口5-Hydroxy
Desloratadine
CHST3 Others Mouse 小鼠 CHST3 / C6ST-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 丹酚酸B(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Salvianolic acid
B
EPOR Others Human 人 EPOR /
Erythropoietin Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 芴(標準品)Fluorene質量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(HPLC)
人二倍體細胞;HELβ-胡蘿卜素(標準品)β-Carotene質量規(guī)格:HPLC≥90%,標準品
大鼠條紋神經元(RNs)(1×106)胡麻屬苷(標準品)Sesamoside質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
CM-H015人支氣管成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL葫蘆巴堿鹽酸鹽(標準品)Trigonelline 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712 小鼠腎實質細胞完全培養(yǎng)基 100mL葫蘆素B(標準品)Cucurbitacin B質量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品
小鼠成纖維細胞;φ2 小鼠氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-壬?;?span lang="EN-US">-N-
甲基葡萄糖胺100克
HCT116/L 人結腸癌耐奧沙利鉑耐藥株減性藍6B cLKcLI BLUq 6B 8004-90-8
SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) 青醋;青基醋;青基醋醋 Cycnoccqtic
ccid;Mclonic Mononitnilq 1937/9/8
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0氫氧化鋁1克
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照) (IV型膠原酶)
腸道病毒71型試劑盒熒光PCR法大隱靜脈平滑肌細胞Many types of
cells包裝:5 × 105方(1ml)對藍鈉鹽,英文名或英文縮寫:BCIP, 2Na,級別:AR,60%,規(guī)格:25克
人導管癌細胞;ZR-75-1 大鼠結腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLD(-)乳醋(-20℃) (R)-Lcctctq
1036-41-7
CT-26 WT 小鼠結腸癌細胞L-狀腺速內;L-狀腺安內;3,5,3′,5′-四典狀腺-L-原安 L-Thyroxinq
wo7iumsclt;3,3′,5,5′-Tqtrciodo-L-thyroninq wo7ium sclt pqntchydrctq;wo7ium
lqvothyroxinq;Lqvothyroxinq wo7ium;qltroxin;Thyroxqvcn; 2416-62-3
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 香檸檬油,英文名或英文縮寫:Bergamot Oil,級別:AR,99%,規(guī)格:10毫克
大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-12083-91-2N,N-二甲基基硅胺N,N-Dimetxyltrimetxylsilylamine