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產(chǎn)品資料

戊型肝炎病毒試劑盒熒光 PCR 法

戊型肝炎病毒試劑盒熒光 PCR 法
  • 如果您對(duì)該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:戊型肝炎病毒試劑盒熒光 PCR 法
  • 產(chǎn)品型號(hào):XG-R63508
  • 產(chǎn)品展商:西格
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
戊型肝炎病毒試劑盒熒光 PCR 法保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品描述

產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷
靈敏度高:可檢測(cè)個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高:有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高:復(fù)孔間差異小,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu):擴(kuò)增效率高,熒光信號(hào)強(qiáng)

產(chǎn)品名稱

戊型肝炎病毒試劑盒熒光 PCR

規(guī)格

50T

貨號(hào)

XG-R63508

儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)**的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾高壓。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
人尿道上皮細(xì)胞HUC甲酯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Methyl Laurate

VERO細(xì)胞衍生株;SVP 大鼠癌細(xì)胞,SHZ-88細(xì)胞 QGY-7701(肝癌細(xì)胞)肉豆蔻酸甲酯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Methyl Myristate

人細(xì)胞;Hela二十烷(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物)質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Eicosane

EPHB6 Others Human EphB6 / EPHB6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二十一烷(>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Heneicosane

CM-H117人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL二十二烷(>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Docosane
mOPC,
小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 Mouse槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Quercitrin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EM1 Others Human EM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) β-谷甾醇β-Sitosterol質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人惡性色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]光甘草定Glabridin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人成纖維母細(xì)胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 )鬼臼(標(biāo)準(zhǔn)品)Podophyllotoxin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞鬼臼(95%)Podophyllotoxin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,BR
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,A172細(xì)胞 Tb 1 Lu細(xì)胞,蝙蝠肺細(xì)胞4'-羥基鹽酸曲唑酮質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口4'-Hydroxy Trazodone HCl

MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 Human鹽酸伐倫克林標(biāo)記15N3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Varenicline  Labeled 15N3

CD2 Others Mouse 小鼠 CD2 / LY37 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 內(nèi)酰胺伐倫克林質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Varenicline Lactam

少突膠質(zhì)前體細(xì)胞培養(yǎng)基OPCM羥基伐倫克林質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Hydroxy Varenicline

IGFBP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-氧基匹格列酮質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Pioglitazone N-Oxide
IFNG Others Mouse
小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) RAFFINOSEPENTAHYDRATE綿子糖,五水超級(jí)100G17629-30-0RT

L6565 小鼠白血病克隆細(xì)胞系丁醋縮水甘油酯 96% (R)-Glycidyl butyrctq 60426-6-0

HEC-1-B人內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 HEC-1-B human endomeial adenocarcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSL-蘇安醋;L-異赤絲藻安基醋 L-Thrqoninq;L-β-xy7noxy-2-cMinobutyric ccid;(2S,3R)-2-cMino-3-xy7noxybutyric ccid;(2S,3R)-(-)-Thrqoninq7-19-2

LGALS1 Protein Rat 重組大鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白WESTERNMAX,HRPCHROMKIT,MOUSE辣根酶發(fā)光檢測(cè)試劑盒,小鼠01 KitCOLD

小鼠心肌細(xì)胞(MCM)(1×106) QGY-7701, 人肝癌細(xì)胞 Human108-01-0NN-二甲基(XZ)N,N-Dimetxylethanolamine
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
戊型肝炎病毒試劑盒熒光 PCR 將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

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