產(chǎn)品特點: 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實驗結(jié)果重復(fù)性強
擴增性能優(yōu)：擴增效率高，熒光信號強

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。
人表皮內(nèi)管皮細(xì)胞(HDLEC)(5×105) 人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human化鉀溶液(100g/L)質(zhì)量規(guī)格：100g/LPotassium iodide solution

CM-H028人血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL化鉀溶液(1/60mol/L(0.1N))質(zhì)量規(guī)格：1/60mol/L(0.1N)Potassium iodide solution

AGA Others Human 人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 潮霉素B(羅氏原裝)質(zhì)量規(guī)格：羅氏原裝,濃度50mg/mlHygromycin B

支氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芹菜苷; 芹黃苷質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Apiin

293001B細(xì)胞，Sars蛋白表達株 人導(dǎo)管癌細(xì)胞,MDA-MB-453細(xì)胞 口腔角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OKM-prf柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野決明苷質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品Chrysoeriol 7-O-glucoside
QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞 Human柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

SFTPD Others Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD / COLEC7 / Collectin-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-羥基丁二(>98%,BR)N-Hydroxysuccinimide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z沒食子酸一水物(標(biāo)準(zhǔn)品)Gallic acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

IL25 Others Rat 大鼠 Ierleukin 25 / IL25 / IL17E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 沒食子酸一水物Gallic acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,AR

SD大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells1-酮戊二酸二鈉鹽(>98%,BR)a-Ketoglutaric acid, di salt, dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]N-苯基-9-蒽胺(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)N-Phenyl-9-anthramine

LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)  1-萘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)1-Iodonaphthalene

CM-H042人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL苯并[a]蒽(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Benz[a]anthracene

HCT116細(xì)胞，人結(jié)直腸癌細(xì)胞 人色素瘤細(xì)胞,HME1細(xì)胞 人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-171H-環(huán)五[l]菲(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)1H-Cyclopenta[l]phenanthrene

GBC-SD(人膽囊癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×29-氨基喜樹堿質(zhì)量規(guī)格：美國進口9-Aminocamptothecin
人脈絡(luò)絲表皮細(xì)胞 (HCPEpiC)( 5×105 )LBBROTH,MILLER(LURIA-BERTANI)LB肉湯組織培養(yǎng)級米白色至棕褐色粉末RTsigma

成骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3-異丁基-1-基皇嘌呤(-20℃) 3-ISOBUTYL-1-MqTHYLXcNTHINq 88-28-4

人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431] 大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLADENOSINEFREEBASE腺苷白色晶體或結(jié)晶粉末COLDsigma

DCS 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞RIBOZOL,RNAEXTRACTIONREAGENTRiboZol RNA 抽提試劑100 mlRT

EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (兩性電解質(zhì)) 12ml
檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
羅斯河病毒試劑盒熒光PCR法將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。