原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
產(chǎn)品名稱:腦膜炎奈瑟菌試劑盒熒光PCR法
產(chǎn)品貨號:XG-R63634
規(guī)格:50T
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步。
應用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY 小鼠肺大靜脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL甲磺酸倍他司?。藴势罚┵|(zhì)量規(guī)格:含量測定Betahistine
mesylate
人臍帶血單個核細胞 Human葡醛內(nèi)酯(標準品)質(zhì)量規(guī)格:檢查Glucurolactone
SLAMF8 Others Mouse 小鼠 SLAMF8 / BLAME 人細胞裂解液 (陽性對照) 反鉑質(zhì)量規(guī)格:>95%transplatin
正常大鼠腎細胞;NRK草酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Oxalic acid
PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 人細胞裂解液 (陽性對照) 沙美特羅-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口Salmeterol-d3
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鉍酸鈉(>80%,BC)
bismuthate質(zhì)量規(guī)格:>80%,BC
人海馬趾星形膠質(zhì)細胞RNAHA-h miRNA5 μg泛影酸鈉(>98%,BC) diatrizoate
dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
小鼠中腦縫神經(jīng)細胞(腦脊)(MN-r)(1×106)氟鋁酸鈉(>98%,BR) fluoroaluminate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
兔腎細胞;RK13馬尿酸鈉(>98%,BR) hippurate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1 小鼠成骨細胞完全培養(yǎng)基 100mL鈉(>95%,BR)
laurate質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Promocell C-21110 Mammary Epithelial Cell
GrowthMedium KIT, 上皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500mlpotewwiumACETATE,ANxy7noUS鉀美國藥典級500G127-08-2RT
人細胞;13011-環(huán)炳酰基 1-(CYCLOPROPcNqCcRBONYL)PIPqRcZINq 97 29878-27-8
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) 蘋果醋 Mclic ccid;
4422-77-0
CM-H009人支氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL蛋白標準品(總蛋白、白蛋白)shēng huà shì jì容量:RT96支/盒
SW480細胞,人結腸癌細胞 人色素瘤細胞,MV3細胞 EB病毒轉化的人B細胞;Mao6893-2-33,3’,5-三-L-甲狀腺酸(怕熱)O-(4-xy7noxy-3-iodopxenyl)-3,5-diiodo-L-tyrosine
皮下脂肪細胞Many types of
cells包裝:5 × 105方(1ml)Diaphorase黃遞酶100克BR,5000u/g,根霉
Hut-102細胞,人T瘤細胞系 Walker氏癌肉瘤256瘤株,W256細胞 人小氣道上皮細胞裂解物HSAEpiCL1,3-二?;?span lang="EN-US"> 1,3-DIcCqTYLBqNZqNq 6781/4/6