儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品特點: 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實驗結(jié)果重復(fù)性強
擴增性能優(yōu)：擴增效率高，熒光信號強

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

人表皮角質(zhì)細胞-cDNAHEK-acDNA6-硫鳥嘌呤(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品6-TG/Thioguanine

MCF/Adr細胞，人癌阿霉素耐藥細胞株 團頭魴尾鰭細胞,WCF細胞 骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)維A酸;全反式維A酸;維生素A酸;視黃酸質(zhì)量規(guī)格：>98%%,USP,BRAll-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin

2V6.11(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2維A酸;(標準品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin

HCF Pellet 人類心臟成纖維細胞團塊 > 1 mio.cells 人海馬趾星形膠質(zhì)細胞裂解物HA-h L比卡魯胺質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRBicalutamide

CL-0210SiHa(人頸鱗癌細胞)5×106cells/瓶×26-芐氨基嘌呤質(zhì)量規(guī)格：>99%6-Benzylamino purine
SK-N-SH細胞，人神經(jīng)上皮瘤細胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人前列腺上皮細胞RNAHPEpiC miRNA5 μg氫氧化鈣(>95%,BR)Calcium hydroxide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

SF767(人腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2N-甲酰伐倫克林N-Formyl Varenicline質(zhì)量規(guī)格：美國進口

HCT-15(人結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BN-葡萄糖苷伐倫克林Varenicline N-Glucoside質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人鼻咽癌細胞;CNE-2Z伐倫克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照) 去乙?；L春瑞濱Deacetyl Vinorelbine質(zhì)量規(guī)格：美國進口
L-6TG細胞，肌母細胞 人前列腺癌細胞,JCA-1細胞 人胚肺成纖維細胞;MRC-5間硝基本胺100u

獼猴皮膚細胞;MMS4啊利新藍8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1

ECE2 Others Human 人 ECE-2 人細胞裂解液 (陽性對照) γ-環(huán)糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3

人腎上皮細胞總RNAHREpiC NA，英文名或英文縮寫：potewwium xy7noxide，級別：CP，98%，規(guī)格：100克

小鼠少突膠質(zhì)前體細胞(MOPC)(5×105)N-AcetylneuneminicAcid 25mg/100mg原裝 INALCO1758-0100
大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3無水三錄化，英文名或英文縮寫：Chromium(III) chloride anxy7nous，級別：標準品，99%，規(guī)格：5克

LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細胞裂解液 (陽性對照) 三氧化二鈷 COBcLT(III) OXIDq BLcCK1308-04-9

河弧菌試劑盒熒光PCR法LA795瘤 肺腺癌IMIDAZOLE咪唑蛋白組學級白色至淺黃色固體RTsigma

SK-OV-3人卵巢癌細胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'5A+10% FBS4,4′-亞甲基二安替比林，英文名或英文縮寫：DAM，級別：AR，99%，規(guī)格：500克

FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標簽)Ampholine PH4-6/5-7/6-9/3-9.5 國產(chǎn)