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產(chǎn)品資料

雞毒支原體(MG)試劑盒熒光-PCR法

雞毒支原體(MG)試劑盒熒光-PCR法
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:雞毒支原體(MG)試劑盒熒光-PCR法
  • 產(chǎn)品型號:XG-R63820
  • 產(chǎn)品展商:西格
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
雞毒支原體(MG)試劑盒熒光-PCR法保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品描述

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)**的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

雞毒支原體(MG)試劑盒熒光-PCR

規(guī)格

50T

貨號

XG-R63820

產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷
靈敏度高:可檢測個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高:有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高:復(fù)孔間差異小,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu):擴(kuò)增效率高,熒光信號強(qiáng)

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾高壓。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

植物直鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒20 偽伐地那非  Pseudo Vardenafil  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

植物質(zhì)粒菌化試劑盒20 N-去乙基伐地那非  N-Desethyl Vardenafil  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

植物種子高質(zhì)化葉綠體分離試劑盒10 伐地那非二鹽酸  Vardenafil Di Salt  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

植物種子活性葉綠體分離試劑盒20 伐地那非-d5  Vardenafil-d5  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

植物種子甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒3 鹽酸貝他定  Bestatin   質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

植物總RNA化試劑盒(低多糖/)20 N-去甲基二鹽酸三氟拉嗪  N-Desmethyl Trifluoperazine Di  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

植物總RNA化試劑盒(高多糖/)20 雙硫侖-d20  Disulfiram-d20  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

植物總氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒20 脫氧膽酸鈉鹽  Deoxycholic Acid,  Salt  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

植物總淀粉+直鏈+支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒20 一水脫氧膽酸鈉   deoxycholate monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

植物總淀粉生物酶比色法定量檢測試劑盒20 雷米普利拉-d5  Ramiprilat-d5  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
伐地那非-d5  Vardenafil-d5  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物種子活性葉綠體分離試劑盒20

鹽酸貝他定  Bestatin   質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物種子甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒3

N-去甲基二鹽酸三氟拉嗪  N-Desmethyl Trifluoperazine Di  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物總RNA化試劑盒(低多糖/)20

雙硫侖-d20  Disulfiram-d20  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物總RNA化試劑盒(高多糖/)20

脫氧膽酸鈉鹽  Deoxycholic Acid,  Salt  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物總氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒20

一水脫氧膽酸鈉   deoxycholate monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物總淀粉+直鏈+支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒20

雷米普利拉-d5  Ramiprilat-d5  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物總淀粉生物酶比色法定量檢測試劑盒20

雷米普利-d3   Ramipril-d3  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物總巰基含量比色法定量檢測試劑盒20

雷米普利拉  Ramiprilat  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物總糖蛋白樹脂法化試劑盒5

甲基4,7,8,9--O-乙酰-2-硫代-N-乙酰-a-D-神經(jīng)氨酸甲酯  Methyl4,7,8,9-tetra-O-acetyl-2-thio-N-acetyl-a-D-neuraminic acidmethylester  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 植物總吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量檢測試劑盒(包括萃取)20
小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 ,英文名: AR ELISA Kit N-芐氧羰基-L-酪氨酸  Z-Tyr-OH  質(zhì)量規(guī)格:0.98

大鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA檢測試劑盒RatCyclin-D1ELISAKit 96T/48T Z-L-酪氨酸甲酯  Z-Tyr-OMe  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

人促甲狀腺素受體(TSHR)試劑盒 Human TSHR ELISA Kit 阿莫西林鈉  Amoxicillin   質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR

RatsolubleE-selectin,sE-selectinELISAKit大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T CBZ-D-纈氨酸  N-Cbz-D-valine  質(zhì)量規(guī)格:0.98

HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒2 Z-Arg(Mtr)-OH·CHA  Z-Arg(Mtr)-OH·CHA  質(zhì)量規(guī)格:0.98

MouseαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISA試劑盒小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T CBZ-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽  H-Lys(Z)-OMe   質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%

雞毒支原體(MG)試劑盒熒光-PCR小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N-CBZ-D-丙氨酸  Z-D-Ala-OH  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR


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