PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號強(qiáng)

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

小鼠谷酸半胱酸連接酶催化亞基(GCLC)ELISA試劑盒 ，英文名： GCLC ELISA Kit 甘草酸單銨鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)  Glycyrrhizic acid ammonium salt  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠谷酸脫氫酶(GDH)ELISA試劑盒 ，英文名： GDH ELISA Kit 甘草酸單銨鹽  Glycyrrhizic acid ammonium salt  質(zhì)量規(guī)格：UV>97%,無水物,BR

小鼠谷酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒 ，英文名： GDH/GLDH ELISA Kit 甘草酸二銨鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）  Diammonium Glycyrrhizate  質(zhì)量規(guī)格：UV≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠谷酸脫羧酶2(GAD2)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD2 ELISA Kit 甘草酸二銨鹽  Diammonium Glycyrrhizate  質(zhì)量規(guī)格：UV≥97%,BR

小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD-Ab ELISA Kit 橄欖苦苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Oleuropein  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgG ELISA Kit 高麗槐素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Maackiain  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit 高良姜素(標(biāo)準(zhǔn)品）  Galangin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠谷酰胺合成酶(GS)ELISA試劑盒 ，英文名： GS ELISA Kit 高三尖杉酯堿(標(biāo)準(zhǔn)品）  Homoharringtonine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠谷酰胺酶(GLS)ELISA試劑盒 ，英文名： GLS ELISA Kit 高香草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Homovanillic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠谷酰胺酶2(GLS2)ELISA試劑盒 ，英文名： GLS2 ELISA Kit 告達(dá)亭苷元  caudatin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
甘草酸二銨鹽  Diammonium Glycyrrhizate  質(zhì)量規(guī)格：UV≥97%,BR 小鼠谷酸脫羧酶2(GAD2)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD2 ELISA Kit

豬瘟病毒(CSFV)試劑盒熒光-PCR法橄欖苦苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Oleuropein  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD-Ab ELISA Kit

小鼠抗**/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒 ，英文名： ADH/VP/AVP ELISA Kit X-gal;5--4氯-3吲哚基β-D半乳糖  X-gal  質(zhì)量規(guī)格：0.99

大鼠生長釋放多肽(GHRP)ELISA檢測試劑盒RatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T 熒光胺  Fluorescamine  質(zhì)量規(guī)格：>98%

人膽7α-羥化酶(CYP7A)試劑盒 Human CYP7A ELISA Kit 4-氯-1-萘酚(4C1N)  4-Chloro-1-naphthol (4-CN)  質(zhì)量規(guī)格：0.99

RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 親和素；卵白素來源于雞蛋白  Avidin from egg white  質(zhì)量規(guī)格：10-15 units/mg protein,進(jìn)分

GST融合蛋白陽性菌落鑒定試劑盒20 鏈霉親和素  Streptavidin from Streptomyces avidinii  質(zhì)量規(guī)格：>15Units/mg protein

MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISA試劑盒小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 西他沙星  Sitafloxacin Hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,水合物,BR
23513-14-66-姜酚規(guī)格  6-Gingerol   英文名稱RatsecretoryIgAELISAKit大鼠分泌型IgA(sIgA)規(guī)格：96T/48T

23496-41-5貝母素甲廠家  Peimine   英文名稱RatsecretoryIgAELISAKit大鼠分泌型IgA(sIgA)規(guī)格：96T/48T

23445-00-3當(dāng)藥醇苷規(guī)格  Swertianolin    英文名稱RatsCD86ELISAKit大鼠sCD86(sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

23313-21-5大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷廠家  Emodin-8-glucoside   英文名稱RatsCD86ELISAKit大鼠sCD86(sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

23180-57-6芍藥苷品牌  Paeoniflorin  英文名稱RatPyruvateKinaseM2ELISAKit大鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)規(guī)格：96T/48T