PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
產品特點: 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復孔間差異小，實驗結果重復性強
擴增性能優(yōu)：擴增效率高，熒光信號強

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內**的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-Ⅱ 96T/48T 蒿本內酯（標準品）  Ligustilide  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)ELISA試劑盒 ，英文名： BMPRⅡ ELISA Kit 和厚樸酚(標準品)  Honokiol  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 ，英文名： BMPR-Ⅱ ELISA Kit 和厚樸酚（標準品）  Honokiol  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠骨鈣素(BGP)ELISA試劑盒 ，英文名： BGP ELISA Kit 和厚樸酚  Honokiol  質量規(guī)格：≥98%,BR

小鼠骨鈣素(OC)ELISA試劑盒 ，英文名： OC ELISA Kit 素（標準品）  Tetrodotoxin  質量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品

小鼠骨鈣素(OT)ELISA試劑盒 ，英文名： OT ELISA Kit 紅景天苷(標準品)  Salidroside  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 紅景天苷  Salidroside  質量規(guī)格：≥98%,BR

小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 ，英文名： OT/BGP ELISA Kit 葒草苷（標準品）  Orientin  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA試劑盒 ，英文名： TNNI2 ELISA Kit XAV-939;NVP-XAV 939  XAV939  質量規(guī)格：>98%

小鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TN1)ELISA試劑盒 ，英文名： TN1 ELISA Kit 胡黃連苷I（標準品）  Picroside I  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
和厚樸酚  Honokiol  質量規(guī)格：≥98%,BR 小鼠骨鈣素(BGP)ELISA試劑盒 ，英文名： BGP ELISA Kit

素（標準品）  Tetrodotoxin  質量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品 小鼠骨鈣素(OC)ELISA試劑盒 ，英文名： OC ELISA Kit

紅景天苷(標準品)  Salidroside  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠骨鈣素(OT)ELISA試劑盒 ，英文名： OT ELISA Kit

紅景天苷  Salidroside  質量規(guī)格：≥98%,BR 小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

葒草苷（標準品）  Orientin  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 ，英文名： OT/BGP ELISA Kit

XAV-939;NVP-XAV 939  XAV939  質量規(guī)格：>98% 小鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA試劑盒 ，英文名： TNNI2 ELISA Kit

胡黃連苷I（標準品）  Picroside I  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TN1)ELISA試劑盒 ，英文名： TN1 ELISA Kit

胡黃連苷 II(標準品)  Picroside II  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠骨骼肌特異性受體酪酸激酶(MUSK)ELISA試劑盒 ，英文名： MUSK ELISA Kit

胡黃連苷 III（標準品）  Picroside III  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 ，英文名： Cr ELISA Kit

胡蘿卜苷(標準品)  Daucosterol  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 ，英文名： OPN ELISA Kit
人蛋白酪氨酸0酸酶自身抗體試劑盒 Human Tyrosine Phosphatase Aoaibodies ELISA Kit 磺酰熒光素(>75.0%(HPLC)(T))  Sulfonfluorescein  質量規(guī)格：>75.0%(HPLC)(T)

RatPeosidineELISAKit大鼠戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T N-琥珀基-7-羥基-3-羧酸酯(>95.0%(HPLC)(T))  N-Succinimidyl 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylate  質量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)

GMS10甲基化基因電轉感受態(tài)5X100微升 N-琥珀基-7-甲氧基-3-羧酸酯(>98.0%(HPLC)(N))  N-Succinimidyl 7-Methoxycoumarin-3-carboxylate  質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)

Mousesolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISA試劑盒小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 5-(2-氨乙基氨基)-1-萘磺酸鈉水合物(>98.0%(HPLC))   5-(2-Aminoethylamino)-1-naphthalenesulfonate Hydrate  質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

牛巴氏桿菌(PB)試劑盒熒光-PCR法小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 ，英文名： B7-2/sCD86 ELISA Kit 四熒光素鉀鹽(>85.0%(HPLC))  Tetrabromofluorescein Potassium Salt  質量規(guī)格：>85.0%(HPLC)

大鼠維生素D3(VD3)ELISA檢測試劑盒RatVitaminD3,VD3ELISAKit 96T/48T 溶劑紅 48(>98.0%(HPLC)(T))  2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrac