儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品特點: 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實驗結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號強(qiáng)

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-14-氨丁醛縮二乙醇質(zhì)量規(guī)格：>97%4,4-Diethoxybutylamine

MDBK細(xì)胞，牛腎細(xì)胞 人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,RKO-AS45-1細(xì)胞 CM-H109人破骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-異丙氧基乙氧基甲基酚質(zhì)量規(guī)格：>97%,液體4-Isopropoxyethoxymethylphenol

大鼠肝細(xì)胞;BRLAVL292質(zhì)量規(guī)格：>98%,高度選擇性的BTK抑制劑AVL-292

IL6ST Others Human 人 IL6ST / gp130 / CD130 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-甲基煙酸質(zhì)量規(guī)格：>98%5-Methylnicotinic acid

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF磺胺嘧啶-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Sulfadiazine-d4
人Burkkit瘤細(xì)胞;Daudi 大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLPS48PS 48質(zhì)量規(guī)格：>99%,PDK1 activator

MMQ 小鼠垂體瘤細(xì)胞阿巴卡韋5'-β-D-葡萄糖苷酸Abacavir 5'-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

FETUB Others Human 人 Fetuin-B / FETUB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-(三氟甲基)煙酰胺4-(Trifluoromethyl)nicotinamide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H19751-甲基-煙酰胺化物1-Methyl-nicotinamide Iodide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 煙酰胺-2,4,5,6-d4Nicotinamide-2,4,5,6-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
斑馬魚尾鰭細(xì)胞;AB.9N-叔丁氧羰基-D-天冬酰，英文名或英文縮寫：Boc-D-asparagine，級別：BR，98%，規(guī)格：1克

DPP4 Others Human 人 DPPIV 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ;芐基溴;α-溴本 Bqnzyl broMidq;ω-BroMotoluqnq

人肺癌細(xì)胞;A-427 [A427]葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-25 Superfine 9041-35-4 100G 分離試劑

人卵巢上皮細(xì)胞(HOSEpiC) ( 5×105 )司班85，英文名或英文縮寫：Span 85，級別：AR，87%，規(guī)格：100克

CM-R056大鼠腎實質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLMaltExtract 100g/500g BD/Sigma分裝
JeKo-1(人套細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) wo7iumACETATE,ANxy7noUS醋酸鈉,無水ACS級,美國藥典級,食品化學(xué)法典級白色結(jié)晶RTsigma

白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2隊三拂氧基本異青醋酯 4-(TrifluoroMqthoxy)phqnyl isocycnctq 32037-73-1

表皮葡萄球菌(SE)試劑盒熒光-PCR法人肺間充質(zhì)干細(xì)胞(肺)(HPMSC)(5×105)改良LETHEEN瓊脂基礎(chǔ)25毫升2～8℃

CM-H136人牙周膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLTWEEN20吐溫20試劑級黃色至琥珀色粘稠液體RTsigma

小鼠瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL10466-65-6高錸酸鉀,99% (metals basis), Re 64%potewwium perrhenate