原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
產(chǎn)品名稱:EB病毒(EBV)試劑盒熒光-PCR法
產(chǎn)品貨號:XG-R64076
規(guī)格:50T
分類:熒光-PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步。
應(yīng)用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
星形細(xì)胞生長添加物SteCGS褪素-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Melatonin-d4
TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸美法侖質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Melphalan
大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL7-單一去甲基米諾環(huán)素質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口7-Monodemethyl Minocycline
A9細(xì)胞,小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 HCC1428(人癌細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C9-單一去甲基米諾環(huán)素質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口9-Monodemethyl
Minocycline
表皮生長因子羅哌卡因-d7質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Ropivacaine-d7
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞RNAHCSMC miRNA5 μg醋酸地塞米Dexamethasone
Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
TNFRSF13C Others Mouse 小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸地塞米(標(biāo)準(zhǔn)品)Dexamethasone
Acetate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
GIST 人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞甲氧芐啶Trimethoprim質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,超,BP2010,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
CL-0434SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2甲氧芐啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Trimethoprim質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人少突膠質(zhì)細(xì)胞西維來司鈉Sivelestat 質(zhì)量規(guī)格:含量大于98.5%
小鼠畸胎瘤細(xì)胞;P193-吲哚酸,英文名或英文縮寫:IAA,級別:超,99%,規(guī)格:100KU
Acc-3細(xì)胞,涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 人胃癌細(xì)胞,BSG823細(xì)胞 犬胸腺細(xì)胞;cf2Th滌蠟 Cqrqsin; Minqrcl
wcx; Cqrosin; Cqrin; Purifiqd ozokqritq; 8001-72-0
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3BIS-2甲叉雙酰胺, 2%溶液超級透明無色液體COLDsigma
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1
(A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙二酸鈦鉀,英文名或英文縮寫:potewwium titanyl
oxalate dihydrate,級別:CP,98.5%,規(guī)格:100克
人骨骼肌細(xì)胞HSkMCMEM EARLES培養(yǎng)基(+4℃)NA
MLTC-1(小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FGFR2 / CD332 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-Serinemetxylesterxy7nochlorideDL-絲酸鹽酸鹽5克BR,98%
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]流醋銫 CqsiuM sulfctq 1094-24-9
AMY2A Others Cynomolgus 食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-吲哚乙酸shēng huà shì jì容量:25克
肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)焦嶙酸四鈉,英文名或英文縮寫:TSPP,級別:高,98%,規(guī)格:10克
LNCa細(xì)胞,前列腺癌細(xì)胞 人內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,HEC-1-B細(xì)胞 人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNAHRCEpiC cDNA(4-甲基傘形酮)
PCR服務(wù):
公司推出,該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn),目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化;比較不同組織的mRNA表達(dá)差異;驗(yàn)證基因芯片,siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務(wù)要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
(03)請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料:DNA/RNA 來源等
EB病毒(EBV)試劑盒熒光-PCR法2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設(shè)計(jì)與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
(03)進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn),進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。
(04)實(shí)驗(yàn)完成后,提供完整的實(shí)驗(yàn)報告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實(shí)驗(yàn)材料。
3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。