原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
產(chǎn)品名稱:轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒熒光-PCR法
產(chǎn)品貨號:XG-R64109
規(guī)格:50T
分類:熒光-PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步。
應(yīng)用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL
1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
T24, 人膀胱癌細胞他扎羅?。藴势罚┵|(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定Tazarotene
人前列腺癌細胞;PC-3 [PC3] 大鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL他扎羅汀質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTazarotene
Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞靈芝酸D(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Ganoderic acid D
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸左西替利嗪(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Levoceitrizine
HCl
615小鼠癌瘤株;Ca761鹽霉素,沙利霉素質(zhì)量規(guī)格:assay
12%~24%Salinomycin
人絨癌細胞;JEG-3 大鼠腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL帕拉米韋三水合物Peramivir
Trihydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)神經(jīng)保護劑NXY059NXY-059,Cerovive質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CN2 Others Mouse 小鼠 Coactin 2 / CN2 人細胞裂解液 (陽性對照) APMSF(進分)p-APMSF, 質(zhì)量規(guī)格:進分,sigma A6664
大鼠主動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL(1R,2S)-1-氨基-2-茚醇 (1R,2S)-(+)-cis-1-Amino-2-indanol質(zhì)量規(guī)格:0.98
PC-12(高分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化) PC-12 (high
differeiation) rat pheochromocytoma cells (high differeiation)
RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-BOC-D-色氨醇N-Boc-D-tryptophanol 質(zhì)量規(guī)格:BR,>98%
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL /
TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽)SALICYLICACID水楊酸鈉100G54-21-6RT
大鼠神經(jīng)質(zhì)細胞(RNsn)(1×106) BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株 Human錄化鉍 Bismuth
trichloridq 7787-60-
人胚腎細胞;293 [HEK-293]AIBI偶氮二異基咪唑啉鹽酸鹽500毫克AR
IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照)
TRIS-GLYCInepUFFER,10XSOLUTIONTris-甘酸緩沖液蛋白組學(xué)級1LCOLD
人腎動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL(多效唑)
35825-57-1隱丹參酮說明書 Cryptotanshinone 載玻片細胞IKB-ALPHA蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
35790-95-5α-常春藤苷品牌 α-hederin 載玻片細胞IGF蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
357-70-0加蘭他敏品牌 Galanthamine 載玻片細胞HISTONEH3蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
3570-40-9白綿馬素AA說明書 Albaspidin AA 載玻片細胞GSK-3BETA蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
35354-74-6和厚樸酚品牌 Honokiol 載玻片細胞GSK-3ALPHA蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
PCR服務(wù):
公司推出,該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。
轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒熒光-PCR法1、熒光定量PCR服務(wù)要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
(03)請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設(shè)計與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
(03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結(jié)果分析。
(04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準:
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準。